分子生物学实验
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免疫共沉淀实验服务
探索生命空间,助力基础研究

服务定位

南京博恩生物可面向高校、科研院所、医院基础科研团队、医药企业和生物技术企业,提供免疫共沉淀(Co-IP)实验外包服务。服务内容可覆盖前期方案评估、抗体适配性判断、裂解体系选择、样本前处理建议、免疫沉淀、洗涤洗脱、Western blot 检测、结果解读、图版整理和完整中文报告交付。

免疫共沉淀适用于蛋白—蛋白相互作用验证、蛋白复合物成员分析、翻译后修饰检测、药物处理前后互作变化比较、标签蛋白互作验证、蛋白截短体结合分析、功能结构域定位和突变体互作能力比较等项目。

博恩生物提供的 Co-IP 服务不只是完成一次免疫沉淀操作,而是更重视项目是否适合 Co-IP、抗体是否可用于 IP、裂解条件是否能保留蛋白复合物、对照体系是否完整、条带结果是否可解释,以及结果能否支持客户后续论文、课题汇报或研发项目判断。

免疫共沉淀实验原理

免疫共沉淀是一种基于抗体与目标蛋白特异性结合的蛋白互作检测技术。实验通常在尽量保留天然蛋白复合物的条件下裂解细胞或组织样本,再使用目标蛋白抗体结合磁珠或琼脂糖珠,将目标蛋白从复杂蛋白混合物中富集出来。如果目标蛋白与其他蛋白在细胞内形成复合物,其相互作用伙伴也可能被共同沉淀下来。

随后通过 Western blot 检测目标互作蛋白是否出现在 IP 产物中。若目标互作蛋白在实验 IP 组中出现,而 IgG 对照或 beads-only 对照中背景较低,则可支持二者在当前样本条件下存在相互作用或处于同一蛋白复合物中。

Co-IP 更适合回答“两个蛋白是否在细胞或组织内天然状态下形成复合物”“药物或刺激是否影响蛋白复合物形成”“某个突变或截短是否影响结合能力”“目标蛋白是否携带泛素化、磷酸化、乙酰化、SUMO 化等修饰”等问题。

需要注意的是,Co-IP 证明的是蛋白复合物共沉淀关系,并不一定等同于两个蛋白直接物理结合。如果需要进一步证明直接结合,通常建议结合 GST pull-down、标签蛋白 Pull-down、体外重组蛋白结合实验或结构域分析共同验证。

博恩可提供的免疫共沉淀服务内容

1、内源Co-IP

适用于在不外源过表达的条件下,验证两个内源蛋白是否在细胞或组织中形成复合物。该类实验更接近天然状态,但通常更依赖目标蛋白表达水平、抗体质量和裂解条件。

2、标签Co-IP

适用于 Flag、HA、Myc、His 等标签系统下的蛋白互作研究。标签 Co-IP 更适合目标蛋白缺少成熟内源抗体、需要比较多个构建体、需要做截短体或突变体分析的项目。

3、蛋白—蛋白相互作用验证

适用于验证两个候选蛋白是否存在互作关系。例如受体与衔接蛋白、转录因子与辅因子、激酶与底物蛋白、泛素连接酶与底物、细胞骨架蛋白与调控蛋白等。

4、蛋白复合物成员分析

适用于已知或推测存在蛋白复合物时,对候选成员进行验证,判断某个蛋白是否参与复合物形成。

5、翻译后修饰检测

适用于泛素化、磷酸化、乙酰化、甲基化、SUMO 化等修饰水平分析。常见策略为先 IP 富集目标蛋白,再使用抗泛素、抗乙酰化、抗磷酸化或特定修饰抗体进行 Western blot 检测。

6、药物处理前后互作变化比较

适用于比较药物处理、刺激处理、抑制剂干预、基因敲低、过表达或突变背景下蛋白复合物形成是否发生变化。该类实验常用于药物作用机制、信号通路验证和靶点机制研究。

7、截短体与突变体结合分析

适用于通过不同长度截短体、缺失体或点突变体比较共沉淀能力,初步定位蛋白结合区域、功能结构域或关键氨基酸位点。

8、IP-WB结果整理与图版支持

可交付输入对照图、IgG 对照图、IP 结果图、修饰检测图、截短体比较图、灰度统计图、图注说明和完整结果报告。对于需要论文、课题汇报或项目申报的客户,可根据合同约定整理图版素材。

适用客户与项目场景

1、高校、医院、科研院所

适用于蛋白互作机制研究、信号通路验证、复合物分析、蛋白修饰检测、论文数据补充、课题申报和结题材料整理。

2、医药企业

适用于靶点作用机制验证、药物影响蛋白复合物研究、通路节点结合变化分析、候选药物作用机制支持和研发阶段机制数据整理。

3、生物技术企业

适用于标签蛋白互作验证、抗体应用验证、蛋白复合物检测、功能结构域分析和产品机制说明。

4、已有候选互作蛋白的项目

适合通过 Co-IP 验证候选蛋白是否处于同一复合物,并进一步判断处理因素是否影响互作强弱。

5、已有突变体或截短体构建的项目

适合比较不同构建体是否仍能共沉淀目标蛋白,从而分析结合区域和功能结构域。

服务内容 服务流程 技术资料
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南京博恩生物技术有限公司
博恩生物——不止于实验,更是基础研究综合解决方案专家

公司成立于2015年,拥有一支由海内外知名大学博士领军的技术性人才团队。博恩生物是一家专注于动物、细胞、分子生物学实验平台的的专业化实验技术外包服务企业,旨在为科研机构提供专业化的动物实验、细胞实验、分子生物学实验技术服务。博恩生物搭建有完善系统的动物疾病模型库、细胞库、原代细胞实验平台、蛋白核酸检测平台、流式细胞术检测平台、液相质谱平台、病理研究平台、成像影像学平台、基因敲减高表达体系平台、药物代谢动力学研究平台、代谢组学研究平台。


博恩生物拥有专家顾问团队千人专家5人,长江学者1人,海外院士2人。拥有完善的基础实验平台、先进的实验设备、专业的技术团队、标准的操作流程、优质的合作平台和强大的科学家网络,可为国内外研究机构提供专业的基础研究技术支持。六大基础服务平台包括:细胞生物学研究平台、分子生物学研究平台、病理学研究平台、免疫学研究平台、动物模型研究平台、蛋白质与多肽研究平台。

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