胰腺导管腺癌动物实验研究用户指南

第一章 指南总览

胰腺导管腺癌动物模型的选择，不能只按“皮下、原位、转移”进行技术分类，更应围绕分子分层、器官微环境、间质屏障、转移方式和免疫场景进行组合式选型。对胰腺导管腺癌项目而言，皮下异种移植模型更适合早期药效、剂量探索和 PK/PD；胰腺原位模型更适合回答器官微环境、局部侵袭、肿瘤渗透、神经周围浸润和术后复发问题；肝转移与腹膜播散模型更适合评估定植、微小残留病灶和抗播散策略；同种免疫完整模型则是免疫治疗、TME 重塑、局部治疗和联合策略的高优先级平台。对胰腺癌来说，真正决定转化价值的往往不是单纯“是否缩瘤”，而是药物能否在高纤维化、低灌注、免疫抑制显著的胰腺环境中仍然起效。

从临床转化路径看，胰腺导管腺癌当前仍以 FOLFIRINOX、吉西他滨 + 白蛋白紫杉醇 为核心化疗参考体系；gBRCA / PALB2 相关项目可引入 PARP 抑制剂 维持或联合策略；KRAS 方向项目需要强调特定突变背景与下游联用；局部递送、消融、放疗或栓塞联合项目，则必须尽早进入原位和转移平台。对于前沿研发，RMC-6236 / daraxonrasib、quemliclustat、CEND-1 等更适合作为在研参考药或机制参考，而非标准上市阳性药。整体上，胰腺导管腺癌更适合采用“皮下早筛—胰腺原位验证—肝转移 / 腹膜播散深化—免疫确认”的递进式路线。

第二章 胰腺导管腺癌细胞系库与分子分层特征

2.1 KRAS 突变 / 间质型代表性细胞系

胰腺导管腺癌研究中，最常用的人源细胞系包括 PANC-1、MiaPaCa-2、AsPC-1、BxPC-3、Capan-1、CFPAC-1。其中，PANC-1、MiaPaCa-2 是 KRAS 突变、间质型和高侵袭背景中最常见的基础模型，适合小分子、KRAS 下游联用、纳米递送和局部治疗早期筛选。若项目目标是 KRAS 通路、CAF 互作、EMT 或高纤维化背景下的药效验证，PANC-1 与 MiaPaCa-2 通常优先于分泌型或上皮型模型。

2.2 分泌型 / DDR 相关代表性细胞系

Capan-1 是 BRCA2 相关和分泌型 PDAC 项目中的高优先级模型，适合 DNA 损伤修复、铂敏感、PARP 联合和长期维持类研究。CFPAC-1 也常用于分泌型和高转移方向补充。若项目聚焦 BRCA / PALB2、HRD、铂敏感维持或 PARP 联合，不宜只用 PANC-1 或 MiaPaCa-2，应同步加入 Capan-1 这类 DDR 更有代表性的模型。

2.3 KRAS 野生型 / EGFR 依赖代表性细胞系

BxPC-3 是 KRAS 野生型、EGFR 依赖方向中最常用的基础模型之一，适合抗 EGFR、双抗、ADC 及部分细胞毒药研究。若项目目标是 KRAS 野生型分层、EGFR 相关策略或目标抗原更稳定的抗体项目，BxPC-3 的优先级较高。

2.4 高转移代表性细胞系

AsPC-1、CFPAC-1、MiaPaCa-2 更适合肝转移、腹膜播散和高侵袭方向研究。其中，AsPC-1 是胰腺癌转移项目中使用频率最高的人源模型之一，适合原位自发转移、肝定植和腹膜播散；MiaPaCa-2 则兼具 KRAS 突变和较好的原位扩展能力。若项目目标是抗转移、抗定植、微小残留病灶或围手术期治疗，不宜只使用皮下模型，应从选株阶段就优先考虑 AsPC-1、MiaPaCa-2 或 luc 标记高转移株。

2.5 同种与免疫完整模型代表株

免疫完整平台中，Pan02 / Panc02、Pan02-luc、KPC 来源细胞、KPC-luc 是最关键的基础模型。对免疫治疗、局部治疗、TME 重塑和器官微环境问题，优先选择同种原位而不是同种皮下。C57BL/6 背景通常优先用于 Pan02 / KPC 系；若项目更强调完整免疫系统与原位土壤的结合，应优先使用 luc 标记株以便观察微小残留病灶与复发。

第三章 皮下异种移植模型（CDX）

皮下 CDX 是胰腺导管腺癌最稳健的早期药效平台，适合药效 PoC、剂量探索、PK/PD 和不同分子或载体体系的横向排序。其优势是操作标准化、重复性高、成本相对较低，适合快速比较小分子、细胞毒药、ADC、纳米药和部分靶向药；其局限是不能真实反映胰腺高纤维化间质、低灌注、免疫抑制、神经周围浸润和肝转移，因此不宜单独作为 IO、抗转移、术后复发或局部治疗项目的决策依据。

3.1 KRAS 突变 / 间质型皮下 CDX

PANC-1 / MiaPaCa-2 + BALB/c nude 或 NSG
模型定位：适合 KRAS 通路、小分子抑制剂、ADC、纳米递送和局部制剂的早期筛选。
造模方法：常规皮下接种 1×10^6–5×10^6 细胞，肿瘤达到 80–150 mm3 后随机分组。
治疗周期：通常 2–4 周；若研究耐药、撤药再挑战或长期持续给药，可延长至 4–8 周。
检测指标：TGI、RTV、终末瘤重、体重；机制终点建议包括 Ki67、cleaved caspase-3、pERK、pS6、药物组织分布。
阳性药推荐：吉西他滨、白蛋白紫杉醇、FOLFIRINOX 等效方案；KRAS 项目可加相应抑制剂或下游联合对照。

3.2 分泌型 / DDR 相关皮下 CDX

Capan-1 / CFPAC-1 + BALB/c nude 或 NSG
模型定位：适合 BRCA / PALB2、HRD、铂敏感、PARP 抑制剂和维持治疗方向。
特点：Capan-1 更适合 DDR 相关项目和长期给药设计；CFPAC-1 可补充高转移与分泌型背景。
阳性药推荐：吉西他滨、铂类、PARP 抑制剂。
应用建议：若项目聚焦 BRCA/PALB2，不应只用通用 KRAS 模型，应至少加入一个 DDR 代表株。

3.3 KRAS 野生型 / EGFR 依赖皮下 CDX

BxPC-3 + BALB/c nude 或 NSG
模型定位：适合 KRAS 野生型、EGFR 依赖、抗体或 ADC 项目早筛。
特点：BxPC-3 常用于目标抗原表达较稳定的抗体类项目，也适合和 KRAS 突变模型并行比较。
阳性药推荐：吉西他滨、白蛋白紫杉醇；若项目涉及 EGFR 或受体依赖，可加相应受体通路对照。

3.4 高转移皮下 CDX

AsPC-1 / MiaPaCa-2 / CFPAC-1 + BALB/c nude、NOD-SCID 或 NSG
模型定位：适合高侵袭、抗转移、局部递药和晚期项目的前期筛选。
特点：AsPC-1 更适合后续升级到肝转移和腹膜播散模型；MiaPaCa-2 适合原位扩展与转移前期筛选。
应用建议：若项目目标是转移或复发，皮下阶段只应用于初筛，不宜作为主要决策平台。

第四章 胰腺原位模型

胰腺原位模型是胰腺导管腺癌项目中最关键的高价值平台之一。与皮下模型相比，原位模型更能真实呈现胰腺器官环境、胰腺纤维化间质、低灌注、局部神经血管关系、胰周浸润以及肝转移前端过程。对局部治疗、纳米递送、药物渗透、放疗、介入治疗、CAF/TME 重塑和术后复发研究而言，原位模型的优先级显著高于皮下模型。其局限是建模手术要求高、死亡率和批间差异更大，通常需要 luc 标记和 IVIS / 超声配合。

4.1 人源原位模型

PANC-1-luc / MiaPaCa-2-luc / AsPC-1-luc / BxPC-3-luc / Capan-1-luc + NSG 或 NOD-SCID
模型定位：适合器官微环境、局部侵袭、局部给药、肿瘤渗透、纤维化间质研究和术后复发研究。
造模方法：将 luc 标记细胞或小肿瘤块接种于胰尾或胰体，必要时术中联合 Matrigel 或缝扎固定以减少泄漏。
特点：PANC-1-luc 与 MiaPaCa-2-luc 更适合 KRAS / 间质型和药物渗透研究；Capan-1-luc 更适合 DDR 方向；AsPC-1-luc 更适合自发肝转移与腹膜播散。
检测指标：原位肿瘤负荷、肝转移、腹膜播散、腹水、超声 / IVIS、生存、CA19-9（如适用）、IHC（Ki67、αSMA、collagen、CD31、CD8/FoxP3）。

4.2 同种原位模型

Pan02-luc / KPC-luc + C57BL/6
模型定位：适合免疫治疗、局部治疗、TME 重塑、转移研究和术后复发。
特点：兼具器官微环境和完整免疫系统，是 PDAC 免疫项目的高优先级平台。
应用建议：若项目是 PD-1/CTLA-4、STING、细胞因子、T 细胞 / NK 疗法、局部治疗联合或放疗联合，优先选择同种原位模型而不是同种皮下模型。

第五章 转移模型

胰腺导管腺癌转移模型中，肝转移和腹膜播散最具临床相关性。肝转移模型更适合回答“药物是否抑制肝定植和肝微环境中的持续生长”；腹膜播散模型更适合回答“药物是否抑制腹腔播散、结节形成和腹水变化”。实验性转移模型更适合回答定植问题，原位自发转移模型则更接近临床自然病程。

5.1 肝转移模型

AsPC-1 / MiaPaCa-2 / Pan02 / KPC 系 + 裸鼠、NSG 或 C57BL/6
模型定位：适合肝定植、肝靶向递药、抗黏附、抗微环境重塑和微小残留病灶研究。
造模方法：实验性模型可采用半脾、脾内或门静脉注射；若项目需要更高临床相关性，应优先采用胰腺原位后的自发肝转移。
特点：脾内 / 门静脉模型成功率高、周期较短，更适合比较“肝定植抑制”能力；原位自发肝转移更适合回答“原发灶—肝转移全流程”问题。
检测指标：肝转移结节数、肝重量、IVIS / 影像、生存、病理。
应用建议：抗转移、抗定植、术后最小残留病灶项目，优先使用原位自发转移或切除后复发模型；实验性肝转移更适合回答器官嗜性和定植问题。

5.2 腹膜播散模型

AsPC-1 / Pan02 / KPC 系 / MiaPaCa-2 + 裸鼠、NSG 或 C57BL/6
模型定位：适合腹腔局部治疗、腹腔灌注、缓释装置、纳米递送和抗播散策略研究。
造模方法：腹腔注射肿瘤细胞，或由胰腺原位模型进展形成腹膜播散。
特点：该模型优于皮下模型来评价腹腔灌注、纳米药、局部缓释装置和抗播散策略，但肿瘤负荷异质性较大，需要标准化评分体系。
检测指标：腹膜结节数、PCI-like 评分、腹水量、生存、器官受累情况。
应用建议：若项目目标是播散抑制或腹腔局部治疗，不应使用皮下模型替代腹膜播散模型。

5.3 原位自发转移模型

AsPC-1-luc / MiaPaCa-2-luc / Pan02-luc / KPC-luc 胰腺原位模型
模型定位：适合原发灶—肝转移 / 腹膜播散全流程研究、围手术期治疗和长期维持治疗。
特点：更接近临床自然病程，但周期更长、变异更大。
应用建议：若项目是抗转移、抗定植或围手术期治疗，不应只做半脾 / 门静脉或腹腔注射模型，应加入原位自发转移设计。

第六章 同种免疫完整模型

同种免疫完整模型最大的价值在于保留完整免疫系统，因此在免疫检查点、STING、细胞因子、放疗联合、细胞治疗和 TME 重塑研究中不可替代。胰腺导管腺癌是典型的免疫抑制型肿瘤，如果只做异种皮下模型，通常会显著低估间质和免疫微环境对结果的影响。对 IO 项目而言，“命中后尽快升级到同种原位或转移模型验证”是非常关键的原则。

6.1 同种皮下模型

Pan02 / KPC 来源细胞 + C57BL/6
模型定位：适合免疫检查点、STING、细胞因子、联合治疗和初步 PK/PD。
造模方法：同品系鼠源细胞皮下接种，肿瘤达到 50–100 mm3 后随机。
治疗周期：通常 10–21 天；同种瘤生长较快，免疫治疗常需较早起始并监测体重与伪进展。
检测指标：体积、生存、体重、流式免疫分型、细胞因子、IHC / 空间免疫。
应用建议：适合免疫早筛，但命中后应尽快升级到同种原位或转移模型。

6.2 同种原位模型

Pan02-luc / KPC-luc + C57BL/6
模型定位：用于免疫治疗、局部治疗、TME 重塑、转移研究和术后复发。
特点：兼具器官微环境和完整免疫系统，是胰腺癌 IO 项目的高优先级平台。
检测指标：原位肿瘤负荷、肝转移、腹膜播散、生存、免疫浸润、单细胞、流式、TCR 谱。
阳性药推荐：吉西他滨、白蛋白紫杉醇、FOLFIRINOX 等效方案，必要时联用 PD-1 / CTLA-4、STING 或放疗等机制性对照。

第七章 人源化免疫模型

人源化模型适合回答普通 CDX 和同种模型都无法充分回答的问题，尤其是双抗、TCE、CAR-T / NK、人源细胞因子以及依赖人免疫系统效应的抗体或 ADC 项目。对 PDAC 而言，这类模型通常不做高通量早筛，而是用于关键节点验证和机制确认。

7.1 huPBMC + 人源 PDAC 模型

模型定位：短周期免疫治疗、双抗和细胞治疗验证。
推荐细胞：PANC-1、MiaPaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、Capan-1。
特点：建模快，适合短程药效、免疫激活和细胞因子释放读数。
局限：xGvHD 风险高，治疗窗短，更适合 2–4 周实验。
应用建议：若项目是双抗、CAR-T / NK 或依赖人免疫系统效应的 ADC，可优先使用此平台做短周期验证。

7.2 huHSC + 人源 PDAC 模型

模型定位：长周期人免疫重建、复杂联合和微环境机制研究。
特点：人免疫系统重建更完整，适合持续性免疫治疗、耐药演化和复杂联合；但周期长、成本高、供者差异明显。
应用建议：适合候选药确认阶段，而不适合作为第一轮筛选平台。

第八章 复发与微小残留病灶模型

胰腺导管腺癌项目若涉及切除后复发、围手术期治疗、微小残留病灶或肝转移再发，单纯皮下模型通常远远不够。更推荐采用胰腺原位模型，在原发灶形成后进行手术切除，再追踪局部复发和肝转移。
推荐模型：Pan02-luc、KPC-luc、AsPC-1-luc、MiaPaCa-2-luc。
这类模型尤其适合研究围手术期治疗、术后维持治疗、微小残留病灶清除和抗转移策略。

第九章 项目升级路径建议

9.1 KRAS 通路、小分子与 ADC 项目

建议路径为：
PANC-1 / MiaPaCa-2 / BxPC-3 皮下 CDX 早筛 → 胰腺原位模型验证器官相关性 → 必要时加入肝转移或腹膜播散模型。
若项目是 KRAS 抑制剂或下游联合，应优先保证突变背景与信号通路读数有效；RMC-6236 / daraxonrasib 更适合作为前沿研发参考，而非标准上市阳性药。

9.2 DDR / BRCA / PALB2 项目

建议路径为：
Capan-1 / CFPAC-1 皮下模型早筛 → 原位模型验证 → 必要时加入切除后复发或肝转移设计。
若项目聚焦铂敏感维持、PARP 联合或 DDR 相关耐药，不应只用通用 KRAS 模型，应优先加入 DDR 代表株。

9.3 免疫治疗与 TME 重塑项目

建议路径为：
Pan02 / KPC 皮下同种模型早筛 → Pan02-luc / KPC-luc 原位模型验证 → 必要时进入肝转移或复发模型。
PDAC 免疫项目若停留在皮下模型，通常不足以支撑转化判断，必须结合原位间质、免疫抑制和转移场景。

9.4 局部递送、放疗与介入项目

建议路径为：
人源或同种胰腺原位模型优先 → 必要时叠加腹膜播散、肝转移或术后复发模型。
对局部给药、缓释装置、消融、放疗联合而言，皮下模型只能提供有限参考，原位模型才是主要决策平台。

第十章 检测指标与阳性药体系

10.1 通用检测指标

皮下模型核心终点：TGI、RTV、ORR-like 分层、体重、终末瘤重。
原位模型核心终点：原位胰腺肿瘤负荷、生存、肝转移、腹膜播散、腹水、超声 / IVIS。
转移模型核心终点：肝转移结节数、PCI-like 评分、腹水量、生存。
免疫模型机制终点：单细胞、流式、TCR 谱、细胞因子、空间免疫。
机制终点：CA19-9（如适用）、Ki67、αSMA、collagen、CD31、CD8/FoxP3、药物组织分布。

10.2 阳性药推荐

通用化疗：吉西他滨、白蛋白紫杉醇、FOLFIRINOX 等效方案。
DDR / BRCA / PALB2：PARP 抑制剂。
KRAS 项目：相应 KRAS 抑制剂或下游联合。
局部递送 / 放疗 / 介入：可加消融、栓塞、放疗联合。
前沿研发参考：RMC-6236 / daraxonrasib、quemliclustat、CEND-1。
其中，前沿在研药更适合作为研发参考药，而不是标准上市阳性药。

第十一章 优势与局限

皮下 CDX
优势是最标准化、最适合高通量早筛和 PK/PD；局限是对胰腺间质、渗透屏障、转移和术后复发外推有限。

胰腺原位模型
优势是更接近真实器官环境，适合局部侵袭、药物渗透、转移和复发研究；局限是手术复杂、通量低、变异更大。

肝转移与腹膜播散模型
优势是可精准回答肝定植、腹腔播散和微小残留病灶问题；局限是实验性模型不能完全替代自然病程，评分体系必须标准化。

同种免疫完整模型
优势是可评估完整免疫系统和 TME 重塑，特别适合 IO 与局部治疗联合研究；局限是鼠瘤与人瘤存在生物学差异。

人源化模型
优势是适合验证人免疫依赖机制，尤其适用于双抗、TCE 和细胞治疗；局限是成本高、供者差异大、xGvHD 风险明显。

胰腺导管腺癌动物模型的关键，不在于模型数量，而在于是否使用了最能回答当前问题的模型。对 KRAS 和常规小分子项目，皮下模型足以完成第一轮排序；对 DDR、局部递送、放疗和高纤维化间质项目，应尽快升级到胰腺原位平台；对转移、复发和围手术期项目，则必须进一步进入肝转移、腹膜播散和切除后复发模型；对免疫治疗项目，应坚持“同种原位优先于同种皮下”。整体建议采用“皮下早筛—原位验证—转移深化—免疫确认”的递进式路径，以提高模型结果对胰腺导管腺癌临床开发的支持价值。