服务定位

南京博恩生物可面向高校、科研院所、医院基础科研团队、医药企业和生物技术企业，提供流式细胞术实验服务。服务内容可覆盖前期方案评估、panel 设计、样本接收与前处理、抗体组合与荧光通道评估、活死染设置、表面染色、胞内染色、核内染色、磷酸化蛋白检测、上机采集、圈门分析、统计作图、发表级结果图整合和完整中文报告交付。

流式细胞术适用于免疫细胞分型、功能亚群分析、肿瘤免疫微环境研究、细胞凋亡与周期检测、细胞增殖分析、胞内细胞因子检测、磷酸化蛋白检测、干细胞与祖细胞表型分析、细胞治疗产品表型评价、药效免疫评价和多参数细胞状态分析等项目。

流式细胞术对样本新鲜度和单细胞状态要求较高。项目启动前，需要根据样本来源、物种背景、目标群体、检测 marker、颜色数、抗体适配性、运输条件和到样时间进行评估。对于由客户自行提供的新鲜样本，需在送样前确认送样地区、运输方式和预计到样时间，确保样本到达时仍满足检测要求。

流式细胞术实验原理

流式细胞术是一种基于单细胞悬液、多参数荧光标记和高速光学检测的分析技术。实验中，细胞经过荧光抗体、染料或探针标记后，以单细胞形式依次通过激光检测区域，仪器同步记录前向散射光、侧向散射光及多个荧光通道信号，从而在单细胞水平分析细胞大小、内部复杂度和特定分子表达状态。

前向散射光通常反映细胞大小，侧向散射光通常反映细胞内部复杂度，荧光信号则反映特定表面分子、胞内分子、核内分子、细胞因子、磷酸化蛋白、活死状态或功能探针信号。通过多参数联合分析，可以在同一样本中同时完成细胞组成、亚群比例、功能状态和 marker 表达变化评估。

与 Western blot、ELISA 等总体检测方法不同，流式细胞术的核心优势在于单细胞、多参数和群体拆分。它不仅能回答“目标分子是否变化”，还可以进一步回答“哪一类细胞发生变化”“某个亚群比例是否改变”“某个功能状态是否增强或减弱”“不同细胞群是否同时表达多个 marker”。

博恩可提供的流式细胞术服务内容

1、常规免疫细胞分型

可开展人、小鼠及常见动物样本的免疫细胞基础分型，例如总白细胞、T 细胞、B 细胞、NK 细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突细胞、中性粒细胞及髓系细胞分析。

2、T细胞功能亚群分析

可围绕 CD3、CD4、CD8、CD45RA、CCR7、CD62L、CD27、CD28、CD69、CD25、FOXP3、PD-1、TIM-3、LAG-3、TIGIT、IFN-γ、IL-2、Granzyme B、Perforin 等 marker，开展 T 细胞分型、活化、记忆、耗竭、Treg、Th1、Th2、Th17 和细胞毒功能分析。

3、B细胞、NK细胞和髓系细胞分析

可围绕 B 细胞成熟分群、NK 细胞状态、单核细胞分型、巨噬细胞极化、树突细胞亚群、中性粒细胞和 MDSC 分型开展检测，适用于免疫微环境、药效免疫评价和炎症免疫研究。

4、肿瘤免疫微环境分析

可针对肿瘤组织、脾脏、淋巴结、外周血、腹水或炎症组织制备单细胞悬液，分析免疫浸润组成、免疫抑制群体、T 细胞耗竭、髓系重塑、MDSC、TAM、Treg、NK 细胞状态等指标。

5、细胞凋亡、周期和增殖检测

可开展 Annexin V/PI 或类似方案的细胞凋亡检测，DNA 含量染色的细胞周期分析，以及 CFSE、CTV、Ki-67 等细胞增殖检测，适用于药效、毒性、细胞损伤、免疫活化和细胞功能研究。

6、胞内细胞因子检测

可检测 IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-17A、TNF-α 等胞内细胞因子，适用于 T 细胞功能、炎症反应、刺激后应答、免疫调节和药物干预研究。

7、磷酸化蛋白流式检测

可检测 p-STAT3、p-STAT5、p-AKT、p-ERK、p-p38、p-S6 等磷酸化蛋白，用于信号通路活化状态评估、细胞因子刺激响应、药物通路抑制和快速功能检测分析。

8、干细胞、祖细胞与分化细胞表型分析

可围绕 CD34、CD38、CD90、CD45RA、CD117、Sca-1、c-Kit 及特定谱系 marker，开展干细胞、祖细胞和分化细胞表型分析。

9、数据整理与图版输出

可交付原始 FCS 文件、圈门策略图、亚群比例结果、MFI 分析结果、统计图、中文报告、中英文图注和发表级整合结果图，便于客户后续论文、汇报及项目材料整理。

适用客户与项目场景

1、高校、医院、科研院所

适用于免疫表型分析、机制研究、动物模型免疫评价、论文补充实验、课题申报数据支持和结题材料整理。

2、医药企业

适用于药效免疫评价、细胞治疗相关检测、抗肿瘤药物免疫机制评价、靶点验证、通路检测、细胞因子功能分析和研发阶段数据支撑。

3、生物技术企业

适用于抗体验证、细胞产品表型分析、多参数筛查、体外功能模型验证、细胞产品质控和项目外包检测。

4、已有新鲜样本但不确定检测方案的项目

适合先进行样本类型、物种、目标群体、marker 组合、颜色数、运输条件和分析逻辑评估，再确定正式检测方案。

5、多参数、多亚群同时分析的项目

适合在同一份样本中同时分析多个细胞群体及其功能状态，例如肿瘤免疫微环境、免疫药效评价、T 细胞功能和髓系细胞重塑研究。