分子生物学实验
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Transwell 实验服务
探索生命空间,助力基础研究

服务定位

南京博恩生物可面向高校、科研院所、医院基础科研团队、医药企业和生物技术企业,提供 Transwell 实验技术服务。服务内容可覆盖前期方案评估、模型路线判断、孔径与膜材质选择、细胞处理条件匹配、迁移/侵袭/趋化/跨内皮迁移/屏障通透性/空气-液体界面培养/上下室共培养模型实施、显微成像、定量分析、统计作图和完整报告交付。

Transwell 实验并不只是肿瘤细胞迁移实验。根据研究问题不同,它可用于细胞迁移、基质侵袭、趋化与定向迁移、白细胞或肿瘤细胞跨内皮迁移、上皮或内皮屏障通透性、上下室旁分泌共培养、空气-液体界面分化培养等多类体外功能研究。

博恩生物提供的 Transwell 服务不只关注“细胞是否穿膜”,而是更重视研究问题拆解、模型路径选择、关键参数匹配、结果读出方式和交付资料整理。对于以“细胞迁移能力是否变化”“是否具备侵袭潜能”“趋化因子是否驱动定向迁移”“某处理是否破坏或修复屏障功能”“上下室细胞是否通过可溶性因子互作”为核心问题的项目,Transwell 平台能够提供较清晰的体外功能验证路径。

Transwell实验原理

Transwell 体系由上室、下室和中间多孔膜组成。研究者可以将细胞接种于上室,在下室加入培养基、血清、趋化因子、药物、条件培养基或另一类细胞,通过上下室之间的浓度差、多孔膜结构或基质屏障,观察细胞是否发生迁移、侵袭、趋化、跨屏障运动或旁分泌信号响应。

在经典迁移实验中,细胞需要穿过多孔膜迁移至膜下表面或下室。若在膜表面预铺 Matrigel 或其他细胞外基质,则可进一步评价细胞穿越基质屏障的能力,即侵袭实验。若下室设置特定趋化因子或条件培养基,可观察细胞是否沿浓度梯度定向迁移,即趋化实验。若先在膜表面构建内皮或上皮单层,则可进一步研究跨内皮迁移、跨上皮迁移或屏障通透性。

需要注意的是,Transwell 实验得到的是一种体外模型结果。它可以评价细胞在特定条件下的迁移、侵袭、趋化或跨膜行为,但不能单独替代动物体内转移、组织浸润或真实屏障生理过程。若研究目标是形成更完整机制证据,通常建议结合细胞活力、划痕实验、基质降解实验、流式细胞术、免疫荧光、qPCR、Western blot、动物模型或组织病理结果共同判断。

博恩可提供的Transwell服务内容

1、经典迁移实验

经典迁移实验主要用于评价细胞是否能够穿过多孔膜向下室迁移,适用于肿瘤细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、内皮细胞和部分免疫细胞的迁移能力研究。

该类实验常用于细胞迁移能力比较、EMT 相关功能验证、基因干预前后迁移变化、药物处理前后迁移能力变化和细胞运动能力评估。

2、侵袭实验

侵袭实验通常在 Transwell 多孔膜表面铺设 Matrigel 或其他细胞外基质,用于模拟细胞穿越基质屏障的过程。与迁移实验相比,侵袭实验更强调细胞降解、穿越或适应基质屏障的能力。

该类实验常用于肿瘤细胞侵袭潜能、转移相关表型、抗侵袭药物功能验证、EMT 功能补充和基质相关机制研究。

3、趋化实验

趋化实验通过上下室之间建立浓度梯度,观察细胞是否发生定向迁移。该类实验适用于单核细胞、巨噬细胞、T 细胞、中性粒细胞、树突细胞和部分肿瘤细胞的趋化响应研究。

常见研究方向包括免疫细胞招募、炎症浸润、趋化因子作用、肿瘤微环境细胞募集、药物干预趋化反应和信号通路机制分析。

4、跨内皮迁移实验

跨内皮迁移实验通常先在 Transwell 膜表面构建内皮细胞单层,再观察免疫细胞、肿瘤细胞或其他细胞跨越内皮屏障的能力。该模型可用于模拟炎症外渗、免疫监视、血管内皮屏障穿越和肿瘤细胞转移相关过程。

该类实验对内皮单层成熟度、细胞接种密度、刺激条件和终点检测方式要求较高。

5、屏障与通透性实验

屏障与通透性实验通常在上皮或内皮单层成熟后开展,用于评价屏障完整性、分子跨膜转运、药物或炎症刺激导致的屏障破坏,以及干预因素对屏障修复的影响。

该类实验适用于血管内皮屏障、肠上皮屏障、肺上皮屏障、血脑屏障相关模型和药物递送研究。常见读出方式包括示踪分子通透性、荧光强度变化、TEER 相关评估、紧密连接蛋白检测和单层状态观察。

6、空气-液体界面培养模型

空气-液体界面培养适用于呼吸道上皮、支气管上皮等细胞的分化培养。通过在多孔膜上建立上皮单层,并在上表面形成空气暴露条件,可用于研究上皮分化、纤毛形成、黏液分泌、感染反应、屏障功能和药物递送相关问题。

该类模型更重视培养周期、细胞来源、单层成熟度和功能分化状态。

7、上下室共培养模型

上下室共培养模型可在上室和下室分别培养不同细胞,用于研究旁分泌信号传递、细胞互作、炎症调节、免疫共培养、上皮—免疫互作、肿瘤—基质互作、内皮—免疫互作等问题。

该类模型适合分析可溶性因子介导的细胞通讯,但不能直接证明细胞接触依赖性互作。

8、结果读出与分析服务

Transwell 实验结果可通过倒置相差显微镜、荧光显微镜、共聚焦成像、晶紫染色、荧光示踪、酶标仪读数、流式细胞术等方式呈现。博恩生物可根据项目目标匹配适合的读出方式,并进行图像计数、定量分析、统计作图、图注说明和报告整理。

适用客户与项目场景

1、高校、医院、科研院所

适用于肿瘤迁移侵袭、免疫细胞趋化、炎症招募、屏障损伤修复、组织重塑、细胞互作、论文机制数据补充和课题结果整理。

2、医药企业

适用于候选药物对迁移、侵袭、趋化、跨内皮迁移、屏障通透性和上皮/内皮修复能力的体外药效评价。

3、生物技术企业

适用于功能产品验证、细胞模型验证、体外屏障模型搭建、细胞互作平台验证和产品机制说明。

4、已有细胞功能结果需要补充迁移或侵袭验证的项目

适合在增殖、死亡、EMT、基质重塑或药物处理结果基础上,进一步补充迁移、侵袭或趋化功能证据。

5、需要构建体外屏障或共培养模型的项目

适合用于上皮、内皮、免疫细胞、肿瘤细胞、成纤维细胞等不同细胞之间的分隔培养、通透性检测和旁分泌互作分析。

服务内容 服务流程 技术资料
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博恩生物拥有专家顾问团队千人专家5人,长江学者1人,海外院士2人。拥有完善的基础实验平台、先进的实验设备、专业的技术团队、标准的操作流程、优质的合作平台和强大的科学家网络,可为国内外研究机构提供专业的基础研究技术支持。六大基础服务平台包括:细胞生物学研究平台、分子生物学研究平台、病理学研究平台、免疫学研究平台、动物模型研究平台、蛋白质与多肽研究平台。

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