子宫内膜癌动物实验研究用户指南

第一章 指南总览

子宫内膜癌动物模型的选择，不能只按“皮下、原位、转移”进行技术分类，更应围绕病理亚型、分子分层、疾病阶段和研发问题进行组合式选型。对大多数项目而言，皮下异种移植模型适合早期药效、剂量探索和 PK/PD 研究；原位子宫模型更适合回答器官微环境、局部侵袭和术后复发问题；腹腔播散或远处转移模型更适合评价浆液样、高侵袭、晚期复发和转移场景；若项目涉及免疫治疗、双抗、TCE 或细胞治疗，则应进一步升级到同种免疫完整模型或人源化模型。

从临床转化角度看，子宫内膜癌的建模核心不是“是否成瘤”，而是“模型是否匹配真实治疗分层”。低级别、雌激素依赖型项目更强调 ER/PR 通路和激素药效；dMMR/MSI-H 项目更强调免疫治疗与化疗联用；pMMR 项目更强调抗血管生成联合免疫；浆液样或 TP53 异常项目则更强调高侵袭、HER2 分层、化疗后耐药及 ADC 策略。2024 年 FDA 已批准 pembrolizumab 联合卡铂/紫杉醇后序贯单药用于原发晚期或复发性子宫内膜癌，dMMR 人群还可用 dostarlimab 或 durvalumab 联合卡铂/紫杉醇后维持，pMMR/非 MSI-H 人群则保留 pembrolizumab + lenvatinib 的后线定位；HER2 阳性实体瘤层面，trastuzumab deruxtecan 已获得 HER2 阳性实体瘤泛瘤种加速批准，可作为 HER2 阳性子宫内膜癌的研发映射参考。

第二章 子宫内膜癌细胞系库与疾病分层特征

2.1 雌激素依赖与分化型代表性细胞系

雌激素依赖、分化型或类 I 子宫内膜癌项目，优先考虑 Ishikawa。该细胞系是最经典的 ER/PR 相关模型之一，适合激素治疗、孕激素、PI3K/AKT/mTOR 通路、代谢通路和长期给药设计。若研究目标聚焦内分泌依赖、ER 信号或激素撤药—再挑战，Ishikawa 通常是优先级最高的平台。

2.2 dMMR / MSI-H 与侵袭型代表性细胞系

HEC-1-A、HEC-1-B 常用于侵袭型、部分 MMR 异常背景及化疗/靶向药研究。与 Ishikawa 相比，这组细胞系通常更适合做非激素依赖、侵袭增强、局部浸润和联合治疗方向。若项目涉及免疫治疗分层、dMMR 相关生物学或 p53/PI3K 路径交织问题，可将 HEC-1-A/HEC-1-B 与 Ishikawa 并行设置，以避免结果局限在单一激素依赖背景。

2.3 高侵袭、浆液样与去分化倾向代表性细胞系

KLE、AN3 CA 是高侵袭和晚期复发方向中最重要的两类基础模型。KLE 更常用于高侵袭、p53 异常、化疗耐药和浆液样倾向研究；AN3 CA 常用于局部侵袭、原位扩展和腹腔播散相关问题。对于需要回答“药物是否能覆盖更难治、去分化或侵袭更强人群”的项目，这两类模型通常比 Ishikawa 更有价值。

2.4 HER2、ADC 与前沿项目的选型逻辑

HER2 在子宫内膜癌中最具转化意义的场景主要是浆液样或 p53 异常亚群。若项目针对 HER2 抗体、ADC 或双抗，应优先选择 HER2 表达可验证、体内表达较稳定的模型，并在皮下与原位阶段都确认 HER2 水平。trastuzumab deruxtecan 在 2024 年获得 HER2 阳性实体瘤泛瘤种加速批准，因此可作为 HER2 阳性子宫内膜癌项目的临床映射参考药；但在具体实验设计上，仍应以“是否确属 HER2 阳性、是否为高侵袭背景”决定模型，而不是将其泛化到全部子宫内膜癌。

第三章 皮下异种移植模型（CDX）

皮下 CDX 是子宫内膜癌最稳健的早期药效平台，适合药效 PoC、剂量探索、PK/PD 关联以及不同候选分子的横向排序。其优势是操作标准化、成本较低、重复性好，适合快速比较小分子、细胞毒药、ADC 和部分靶向药；其局限是不能真实反映子宫微环境、局部侵袭、宫腔出血样表现、腹腔播散和远处转移，因此不宜单独作为免疫项目、复发项目或抗转移项目的决策依据。

3.1 分化型 / 激素依赖皮下 CDX

Ishikawa + BALB/c nude 或 NSG
模型定位：适合激素治疗、孕激素、PI3K/AKT/mTOR 抑制剂、代谢相关药物及长期维持类方案的早期筛选。
造模方法：常规皮下接种，肿瘤达到约 80–150 mm3 后随机分组。若研究激素依赖性，可根据项目需要叠加雌激素或孕激素背景。
治疗周期：通常 2–4 周；若研究激素耐药、撤药再挑战或长期维持，可延长至 4–8 周。
检测指标：TGI、RTV、终末瘤重、体重，机制终点可加入 ER、PR、Ki67、cleaved caspase-3、pAKT、pS6。
阳性药推荐：卡铂 + 紫杉醇可作为通用细胞毒对照，激素方向可加入孕激素类或 PI3K/AKT/mTOR 相关对照。

3.2 dMMR / 侵袭型皮下 CDX

HEC-1-A / HEC-1-B + BALB/c nude、NOD-SCID 或 NSG
模型定位：适合化疗、联合靶向药、部分免疫联用前期验证以及 dMMR / pMMR 分层下的基础药效比较。
特点：相较 Ishikawa，这类模型更适合侵袭增强、非激素依赖和局部浸润方向；若项目涉及免疫治疗，皮下阶段更适合做基础肿瘤负荷变化和 PK/PD，不应替代后续免疫完整或人源化验证。
阳性药推荐：卡铂 + 紫杉醇；dMMR/MSI-H 相关方向可把 PD-1 通路药作为机制性参考，但真正验证仍应放到同种或人源化模型。

3.3 高侵袭 / 浆液样皮下 CDX

KLE / AN3 CA + NOD-SCID 或 NSG
模型定位：适合高侵袭、晚期复发、浆液样倾向、HER2 或 ADC 方向的早期筛选。
特点：KLE 和 AN3 CA 皮下模型常用于“更难治背景”验证，适合做化疗后耐药、ADC 排序、HER2 或 p53 异常背景下的项目。
阳性药推荐：卡铂 + 紫杉醇；HER2 阳性项目可加入 trastuzumab 或 trastuzumab deruxtecan 作为映射参考；若项目定位后线 pMMR 场景，可将 pembrolizumab + lenvatinib 作为机制参考思路。

第四章 原位子宫模型

原位子宫模型相较于皮下模型，更能反映子宫内膜癌的器官微环境、局部浸润、肌层侵犯、宫腔负荷和术后复发过程。对于需要回答“药物是否改变局部侵袭或宫腔内病灶行为”的项目，原位模型优先于皮下模型。其局限在于操作复杂、通量低、对 luc 标记和活体影像依赖较强，因此更适合命中后的升级验证，而非大规模早筛。

4.1 人源原位模型

Ishikawa-luc / HEC-1-A-luc / AN3 CA-luc / KLE-luc + NSG 或 NOD-SCID
模型定位：适合局部侵袭、子宫微环境、术后复发和局部递药研究。
造模方法：将 luc 标记细胞植入子宫角或宫腔相关部位，随后通过 IVIS 或超声监测原位肿瘤负荷。
特点：Ishikawa-luc 更适合激素依赖和低侵袭背景；HEC-1-A-luc 适合侵袭型和复发方向；AN3 CA-luc 与 KLE-luc 更适合高侵袭、肌层侵犯和腹腔扩展问题。
检测指标：原位肿瘤负荷、局部侵袭、子宫重量、体重变化、生存、IHC（MMR、p53、HER2、Ki67、CD8）。

4.2 复发与微小残留病灶原位模型

原位模型与化疗、激素治疗或局部切除结合后，可构建更贴近临床的复发与微小残留病灶场景。
推荐思路：Ishikawa 或 HEC-1-A 原位成瘤后，给予孕激素、卡铂/紫杉醇或其他标准治疗诱导负荷下降，再观察停药后的局部复发；高侵袭方向可使用 AN3 CA 或 KLE 做更高强度复发模型。
这类设计尤其适合维持治疗、停药反跳和局部控制策略研究。

第五章 腹腔播散与转移模型

子宫内膜癌虽然不像卵巢癌那样以腹腔播散为主，但在高侵袭、晚期复发、浆液样和去分化背景下，腹腔播散与远处定植仍具有较高研究价值。对这类项目而言，仅使用皮下或原位模型往往不足，必须增加腹腔播散或实验性转移平台来验证真实晚期行为。

5.1 腹腔播散模型

AN3 CA-luc / KLE-luc / HEC-1-B-luc + NSG 或 NOD-SCID
模型定位：适合晚期播散、腹膜种植、复发后进展和高侵袭项目。
造模方法：腹腔注射 luc 标记细胞，动态观察腹腔结节、腹膜播散和生存。
特点：AN3 CA 和 KLE 更适合快速播散与高侵袭场景；HEC-1-B 可作为较中等侵袭背景补充。
检测指标：腹腔总生物发光信号、结节数、腹腔负荷评分、体重、生存、病理。

5.2 实验性远处转移模型

对肺、肝等器官定植研究，可采用尾静脉、左心室或脾内/门静脉等方式建立实验性转移模型。
应用建议：这类模型在子宫内膜癌中并非主平台，更适合作为特定机制问题补充，而不应替代原位或局部侵袭模型作为主要决策平台。
若项目目标是局部侵袭与复发，优先仍应是原位模型；若目标是晚期高侵袭和系统播散，才考虑进一步加入实验性转移模型。

第六章 同种免疫完整模型

同种免疫完整模型最大的价值在于保留完整免疫系统，因此在免疫治疗、放疗联合、TME 重塑、细胞因子和局部免疫治疗研究中不可替代。对子宫内膜癌而言，尤其是 dMMR/MSI-H 方向，若只停留在异种皮下模型，通常不足以判断真实免疫应答。2024 年 FDA 对 endometrial cancer 的更新进一步强化了这一点：dMMR 人群前线已可使用 dostarlimab 或 durvalumab 联合卡铂/紫杉醇，说明免疫分层已经进入标准治疗层面。

6.1 同种皮下模型

可选择鼠源子宫内膜癌细胞在匹配品系小鼠中建立皮下模型，用于免疫检查点、STING、细胞因子、放疗联合和基础 TME 筛选。
模型定位：更适合免疫早筛，而非最终决策。
检测指标：体积、生存、流式免疫分型、细胞因子、IHC。
应用建议：命中后应尽快升级到原位或更高相关性的免疫完整模型。

6.2 同种原位模型

同种原位子宫模型更适合模拟局部免疫微环境、肌层侵犯和免疫药物在器官环境下的真实表现。
模型定位：适合 dMMR 免疫治疗、局部治疗、放疗联合和复发研究。
特点：兼具器官微环境和完整免疫系统，是免疫项目优先级更高的平台。
检测指标：原位负荷、生存、免疫浸润、流式、IHC、单细胞。

第七章 人源化免疫模型

人源化模型适合验证普通 CDX 和同种模型都无法充分回答的问题，尤其是 PD-1/PD-L1 联合、双抗、TCE、CAR-T/NK 及其他强依赖人免疫系统的策略。对子宫内膜癌而言，这类模型通常用于关键节点确认，而非高通量筛选。

7.1 huPBMC + 人源子宫内膜癌模型

模型定位：短周期免疫治疗、双抗和细胞治疗验证。
推荐细胞：Ishikawa、HEC-1-A、HEC-1-B、KLE、AN3 CA。
特点：建模快，适合短程药效和免疫激活读数。
局限：xGvHD 风险较高，治疗窗短，更适合 2–4 周内的实验。
应用建议：若项目涉及 PD-1 联合、双抗或 ADC 的人免疫依赖机制，可优先使用此类模型。

7.2 huHSC + 人源子宫内膜癌模型

模型定位：长周期人免疫重建、复杂联合和免疫耐药研究。
特点：人免疫系统重建更完整，适合持续给药、长期联合和微环境机制研究。
局限：成本高、周期长、供者差异明显。
应用建议：适合在候选药确认阶段使用，而不适合作为第一轮筛选平台。

第八章 项目升级路径建议

8.1 激素依赖 / 分化型项目

建议路径为：
Ishikawa 皮下 CDX 早筛 → Ishikawa 原位模型验证器官相关性 → 必要时加入停药复发或长期维持设计。
若项目聚焦孕激素、激素撤药反跳、ER/PR 或 PI3K/AKT/mTOR 方向，应优先保证长期给药窗口，而不是只观察短期 TGI。

8.2 dMMR / MSI-H 免疫项目

建议路径为：
HEC-1-A / HEC-1-B 皮下模型做基础药效与 PK/PD → 同种或人源化模型验证免疫依赖机制 → 必要时进入原位模型。
在临床映射上，dMMR 人群可优先参考 dostarlimab + carboplatin/paclitaxel 或 durvalumab + carboplatin/paclitaxel 的前线策略；单药 PD-1/PD-L1 则更适合后线或机制性参考。

8.3 pMMR / 非 MSI-H 项目

建议路径为：
皮下 CDX 早筛 → 原位或高侵袭模型验证 → 必要时加入人源化模型。
临床映射上，pMMR / 非 MSI-H 晚期子宫内膜癌后线仍可参考 pembrolizumab + lenvatinib，因此若项目定位 pMMR 人群，模型设计中应尽量覆盖侵袭、耐药和血管生成相关端点。

8.4 HER2 / ADC / 高侵袭项目

建议路径为：
HER2 可验证的皮下模型做基础排序 → 高侵袭原位或腹腔播散模型验证 → 必要时加入人源化模型。
trastuzumab deruxtecan 可作为 HER2 阳性实体瘤方向的映射参考；selinexor 仍处于 III 期研究推进中，主要聚焦 TP53 wild-type pMMR 人群，预计 2026 年披露关键顶线结果，因此现阶段更适合作为研发参考，而非标准上市阳性药。

第九章 检测指标与阳性药体系

9.1 通用检测指标

皮下模型核心终点：TGI、RTV、终末瘤重、体重。
原位模型核心终点：原位肿瘤负荷、子宫重量、局部侵袭、生存、IHC。
腹腔播散模型核心终点：结节数、腹腔病灶负荷、生存、体重变化。
免疫模型机制终点：CD8、Treg、髓系细胞谱、细胞因子、人免疫重建率。
机制终点：MMR、p53、HER2、ER、PR、Ki67、cleaved caspase-3。

9.2 阳性药推荐

通用细胞毒治疗：卡铂 + 紫杉醇。
dMMR / MSI-H：PD-1 通路药；前线可参考 dostarlimab + carboplatin/paclitaxel 或 durvalumab + carboplatin/paclitaxel。
全部人群前线：pembrolizumab + carboplatin/paclitaxel 后序贯单药 pembrolizumab。
pMMR / 非 MSI-H 后线：pembrolizumab + lenvatinib。
HER2 阳性 / 高侵袭：trastuzumab 或 trastuzumab deruxtecan。
前沿研发参考：selinexor 仍处于 III 期推进，adavosertib 仍更适合作为在研参考而非标准阳性药。

第十章 优势与局限

皮下 CDX
优势是标准化程度最高、成本较低、适合早筛和 PK/PD；局限是不能真实反映子宫器官环境、局部侵袭和复发转移。

原位子宫模型
优势是更接近真实器官环境，适合局部侵袭、术后复发和长期维持研究；局限是操作复杂、通量低、对影像平台要求高。

腹腔播散 / 高侵袭模型
优势是适合高侵袭、晚期复发和难治背景验证；局限是批间差异更大、定量复杂。

同种免疫完整模型
优势是可评估完整免疫系统下的药效和机制；局限是鼠瘤与人瘤存在生物学差异。

人源化模型
优势是适合验证人免疫依赖机制，尤其适用于免疫联合、双抗、TCE 和细胞治疗；局限是成本高、供者差异和 xGvHD 风险明显。

子宫内膜癌动物模型的关键，不在于模型数量，而在于是否用正确的模型回答了当前阶段最关键的问题。对分化型和激素依赖项目，应优先保证 ER/PR 相关性与长期给药窗口；对 dMMR 项目，应尽早引入免疫完整或人源化平台；对 pMMR 项目，应把耐药、侵袭和血管生成场景前置；对 HER2 和高侵袭项目，则应尽快从皮下模型升级到原位或播散模型。整体建议采用“皮下早筛—原位验证—高侵袭/复发深化—免疫确认”的递进路径，以提高模型结果对子宫内膜癌临床开发的支持价值。