肾细胞癌动物实验研究用户指南

第一章 指南总览

肾细胞癌动物模型的选择，不能只按“皮下、原位、转移”进行技术分类，更应围绕病理亚型、分子分层、肾脏器官微环境、转移器官偏好和免疫场景进行组合式选型。对肾细胞癌项目而言，皮下异种移植模型更适合早期药效、剂量探索和 PK/PD；肾包膜下或肾实质原位模型更适合回答器官微环境、局部侵袭、肿瘤血供和术后复发问题；肺转移和骨转移模型更适合评估晚期播散与器官定植；同种免疫完整模型则是 VEGF/TKI、HIF-2α、免疫检查点和免疫联合研究的高优先级平台。

从临床转化角度看，当前肾细胞癌的系统治疗已形成较明确的映射框架：一线常用参考包括 nivolumab + ipilimumab、nivolumab + cabozantinib、pembrolizumab + lenvatinib；VEGF/TKI 方向仍可用 sunitinib、axitinib、cabozantinib 作为基础对照；HIF-2α 方向则以 belzutifan 作为高优先级参照药。对于清晰细胞肾细胞癌项目，建议采用“皮下早筛—肾原位验证—肺/骨转移深化—免疫确认”的递进式路线，而不宜仅凭单一皮下缩瘤结果判断项目价值。

第二章 肾细胞癌细胞系库与疾病分层特征

2.1 清晰细胞肾细胞癌代表性细胞系

清晰细胞肾细胞癌是肾细胞癌动物建模中的主流场景。常用人源细胞系包括 786-O、769-P、A498。其中，786-O 是 HIF/VHL 轴研究中最常用的模型之一，适合 VEGF、HIF-2α、小分子抑制剂和 ADC 早期筛选；769-P 适合清晰细胞背景下的基础药效研究；A498 则常用于 VEGF/TKI、代谢和部分靶向方向。若项目目标是清晰细胞肾细胞癌的小分子、抗体或放射性配体早期验证，786-O 与 769-P 通常是优先级最高的平台。

2.2 转移与侵袭代表性细胞系

若项目聚焦侵袭、晚期播散和器官定植，应优先考虑 Caki-1、ACHN。其中，Caki-1 常作为转移性或高侵袭背景模型使用，适合原位和肺转移相关研究；ACHN 在转移与侵袭研究中应用广泛，常用于原位、实验性转移和高侵袭场景。与 786-O 相比，这组模型更适合回答“药物是否能覆盖更高恶性程度和更强播散倾向的人群”。

2.3 MET、血管生成与前沿项目选型逻辑

若项目涉及 MET 或更偏侵袭迁移背景，可加入 OS-RC-2 作为补充模型。若项目聚焦 VEGF/TKI、血管生成、缺氧、HIF-2α 或肿瘤血供，建议尽早从皮下模型升级到原位模型，因为肾脏器官环境、血供和缺氧梯度对子宫内膜癌、乳腺癌这类瘤种之外的肾癌结果影响更大。

2.4 同种与免疫完整模型代表株

免疫完整平台中，RENCA / RENCA-luc 是肾细胞癌最经典的小鼠同种模型，适用于 BALB/c 背景下的免疫检查点、联合免疫和 TME 研究。与人源异种模型不同，RENCA 的价值不在于“更像人瘤本身”，而在于保留完整免疫系统，能评估 IO 联用、STING、细胞因子以及 T 细胞/NK 细胞疗法的早期可行性。

第三章 皮下异种移植模型（CDX）

皮下 CDX 是肾细胞癌最稳健的早期药效平台，适合药效 PoC、剂量探索、PK/PD 关联以及不同候选分子的横向排序。其优势是操作标准化、成瘤率高、重复性好，适合快速比较小分子、细胞毒药、ADC、纳米药和部分靶向药；其局限是不能真实反映肾脏微环境、局部血供、侵袭路线和转移行为，因此不宜单独作为 IO、抗转移、术后复发或局部治疗项目的决策依据。

3.1 清晰细胞肾细胞癌皮下 CDX

786-O / 769-P / A498 + BALB/c nude 或 NSG
模型定位：适合 ccRCC 的小分子、VEGF/TKI、HIF-2α 抑制剂、ADC 和早期 PK/PD 研究。
造模方法：常规皮下接种 1×10^6–5×10^6 细胞，肿瘤达到约 80–150 mm3 后随机分组。
治疗周期：通常 2–4 周；若研究耐药、撤药再挑战或长期持续给药，可延长至 4–8 周。
检测指标：TGI、RTV、终末瘤重、体重；机制终点建议包括 CAIX、Ki67、CD31、HIF-2α、VEGF、cleaved caspase-3。
阳性药推荐：sunitinib、axitinib、cabozantinib、belzutifan。belzutifan 已获 FDA 批准用于既往接受过 PD-1/PD-L1 抑制剂和 VEGF-TKI 后的晚期 RCC，因此在 HIF-2α 方向项目中应作为高优先级映射对照。

3.2 转移 / 高侵袭皮下 CDX

Caki-1 / ACHN + BALB/c nude、NOD-SCID 或 NSG
模型定位：适合高侵袭、晚期播散、局部递药、ADC 和转移前期筛选。
特点：Caki-1 更适合后续升级到原位或肺转移平台；ACHN 适合侵袭、迁移和部分骨转移前期研究。
阳性药推荐：sunitinib、cabozantinib、axitinib；若项目强调 HIF-2α，可增加 belzutifan 作为参考。

3.3 MET 及特定通路皮下 CDX

OS-RC-2 + BALB/c nude 或 NSG
模型定位：适合 MET 相关、侵袭迁移及特定靶向药前期验证。
应用建议：若项目聚焦 MET 或相关旁路激活，OS-RC-2 更适合作为补充平台，而不是替代 786-O/769-P 的通用 ccRCC 基础平台。

第四章 原位肾脏模型

原位肾脏模型比皮下模型更接近真实器官环境，能够更好反映肾脏血供、局部侵袭、肾包膜外突破、静脉侵袭、局部复发和远处转移前端过程。对需要回答“药物是否真正改变肾脏器官环境中的生长和播散行为”的项目，肾包膜下或肾实质原位模型优先级明显高于皮下模型。其局限是手术操作要求高、批间差异和死亡率更高，通常需要 luc 标记和 IVIS/超声/MRI 配合。

4.1 人源原位模型

786-O-luc / Caki-1-luc / ACHN-luc + NSG 或 NOD-SCID
模型定位：适合器官微环境、局部侵袭、局部给药、转移和术后复发研究。
造模方法：将 luc 标记细胞或小肿瘤块植入肾包膜下或肾实质，术后利用 IVIS、超声或 MRI 监测。
特点：786-O-luc 更适合清晰细胞背景和 HIF-2α 项目；Caki-1-luc 与 ACHN-luc 更适合局部侵袭、肺转移和术后复发。
检测指标：原位肿瘤负荷、肾原位血供、肾周侵袭、肺/肝转移、生存、IHC（CAIX、Ki67、CD31）以及血清化学指标。

4.2 同种原位模型

RENCA / RENCA-luc + BALB/c
模型定位：适合免疫治疗、联合治疗、局部治疗、TME 重塑和术后复发研究。
特点：RENCA 原位模型兼具器官微环境和完整免疫系统，是肾细胞癌 IO 项目中的高优先级平台。
应用建议：若项目是 PD-1/CTLA-4、STING、细胞因子、T 细胞/NK 疗法或 VEGF/TKI 联合免疫，优先选择 RENCA 原位，而不应停留在 RENCA 皮下模型。

第五章 转移模型

肾细胞癌转移模型中，肺转移和骨转移最具临床相关性。对大多数晚期肾细胞癌项目而言，若没有原位转移或实验性转移数据，模型外推价值通常有限。转移模型主要回答两个问题：一是药物能否抑制定植；二是药物能否在特定器官微环境中持续起效。实验性转移模型更适合“定植”问题，原位自发转移模型则更适合“完整病程”问题。

5.1 原位自发转移模型

RENCA-luc / Caki-1-luc / ACHN-luc 原位肾脏模型
模型定位：适合原发灶—肺/肝转移全流程研究、术后复发和围手术期治疗。
造模方法：先建立肾包膜下或肾实质原位瘤，再观察肺或肝转移；必要时叠加肾切除设计。
特点：更贴近临床自然病程，是复发/转移项目的高优先级平台。
检测指标：原位负荷、肺转移结节、肝转移、IVIS、生存、肾床残留。

5.2 实验性肺转移模型

Caki-1 / ACHN / RENCA
模型定位：适合肺定植、外播散和抗转移策略早期验证。
造模方法：常用尾静脉注射。
特点：重复性高、周期短，但主要反映循环后肺定植阶段，不等于完整自然转移过程。
应用建议：若项目目标是抗转移或围手术期治疗，不应只使用尾静脉模型，应加入原位自发转移设计。

5.3 骨转移模型

肾细胞癌骨转移研究可采用左心室注射或胫骨内接种的方式建立实验性骨转移平台。
模型定位：适合骨微环境、骨破坏、骨痛、放疗联合和骨靶向策略。
推荐细胞：ACHN、Caki-1 及部分高侵袭衍生株。
应用建议：骨转移在 RCC 中临床相关性高，但实验复杂、通量低，更适合作为中后期深化平台，而不是第一轮筛选工具。

第六章 同种免疫完整模型

同种免疫完整模型最大的价值在于保留完整免疫系统，因此在免疫检查点、VEGF/TKI 联合免疫、STING、细胞因子、溶瘤病毒和细胞治疗研究中不可替代。肾细胞癌是高度免疫相关的适应症之一，如果只做异种皮下模型，通常会低估免疫系统和肾脏器官环境对结果的影响。临床上一线方案中，nivolumab + ipilimumab、nivolumab + cabozantinib、pembrolizumab + lenvatinib 都已成为重要参考，这进一步说明同种原位平台的必要性。

6.1 同种皮下模型

RENCA / RENCA-luc + BALB/c
模型定位：适合免疫检查点、STING、细胞因子、联合治疗和初步 PK/PD。
造模方法：同品系鼠源细胞皮下接种，肿瘤达到 50–100 mm3 后随机。
治疗周期：通常 10–21 天；免疫治疗常需较早起始，并监测体重和伪进展。
检测指标：体积、生存、体重、流式免疫分型、细胞因子、IHC/空间免疫。
应用建议：适合 IO 早筛，但命中后应尽快升级到原位或转移模型。

6.2 同种原位模型

RENCA-luc 原位肾脏模型 + BALB/c
模型定位：适合免疫治疗、联合治疗、局部治疗、TME 重塑和复发研究。
特点：兼具器官微环境和完整免疫系统，是肾细胞癌 IO 项目的高优先级平台。
检测指标：原位肿瘤负荷、流式、单细胞、CD8/Treg、髓系谱、细胞因子、生存。
阳性药推荐：抗 PD-1、抗 CTLA-4、VEGF/TKI 联合免疫。

第七章 人源化免疫模型

人源化模型适合验证普通 CDX 和同种模型都无法充分回答的问题，尤其是双抗、TCE、CAR-T/NK、人源细胞因子以及依赖人免疫系统效应的抗体或 ADC 项目。对肾细胞癌而言，这类模型通常不做高通量早筛，而是用于关键节点验证和机制确认。

7.1 huPBMC + 人源肾细胞癌模型

模型定位：短周期免疫治疗、双抗和细胞治疗验证。
推荐细胞：786-O、769-P、A498、Caki-1、ACHN。
特点：建模快，适合短程药效、免疫激活和细胞因子释放读数。
局限：xGvHD 风险高，治疗窗短，更适合 2–4 周实验。

7.2 huHSC + 人源肾细胞癌模型

模型定位：长周期人免疫重建、复杂联合和微环境机制研究。
特点：重建更完整，适合持续性免疫反应、耐药演化和复杂联合；但周期长、成本高、供者差异明显。
应用建议：适合候选药确认阶段，而不适合作为第一轮筛选。

第八章 复发与微小残留病灶模型

肾细胞癌项目若涉及术后复发、围手术期治疗、微小残留病灶或肾床残留，单纯皮下模型通常远远不够。更推荐采用原位肾脏模型，在原发灶形成后进行肾切除，再追踪肺/肝复发和肾床残留。
推荐模型：RENCA-luc、786-O-luc、Caki-1-luc。
这类模型尤其适合研究围手术期治疗、术后维持治疗和微小残留病灶清除策略。术后复发优先肾包膜下 RENCA 或 786-O/Caki-1 原位 + 肾切除作为核心建议。

第九章 项目升级路径建议

9.1 ccRCC 小分子、ADC 与 HIF-2α 项目

建议路径为：
786-O / 769-P / A498 皮下 CDX 早筛 → 原位肾脏模型验证器官相关性 → 必要时加入肺转移或复发模型。
若项目是 HIF-2α 抑制剂，应优先保证 VHL/HIF 相关性和 CAIX、HIF-2α 读数有效；belzutifan 是当前该方向的高优先级映射参考。

9.2 转移与高侵袭项目

建议路径为：
Caki-1 / ACHN 皮下模型做前期排序 → 原位模型验证局部侵袭 → 原位自发转移或实验性肺转移模型验证晚期场景。
若项目目标是抗转移、抗定植或围手术期治疗，不建议停留在皮下模型。

9.3 VEGF/TKI 与免疫联合项目

建议路径为：
RENCA 皮下早筛 → RENCA 原位模型验证 → 必要时加入复发或肺转移模型。
临床映射上，可优先参考 nivolumab + ipilimumab、nivolumab + cabozantinib、pembrolizumab + lenvatinib。

9.4 前沿研发项目

casdatifan、AB521、XL092 等目前更适合作为前沿研发参考，而非标准上市阳性药。对于这类项目，建议至少同时覆盖一个清晰细胞早筛平台和一个原位或转移平台，以避免高估单一皮下结果的外推价值。

第十章 检测指标与阳性药体系

10.1 通用检测指标

皮下模型核心终点：TGI、RTV、ORR-like 分层、体重、终末肿瘤重量。
原位模型核心终点：原位负荷、生存、肾原位血供、局部侵袭和远处转移。
转移模型核心终点：肺/骨转移负荷、影像、生存。
免疫模型机制终点：流式免疫分型、细胞因子、IHC/空间免疫。
机制终点：CAIX、Ki67、CD31、血清化学、micro-CT、IVIS。

10.2 阳性药推荐

VEGF/TKI：sunitinib、axitinib、cabozantinib。
HIF-2α：belzutifan。
免疫联合：nivolumab + ipilimumab、nivolumab + cabozantinib、pembrolizumab + lenvatinib。
后续研发参考：casdatifan / AB521、XL092。
其中，nivolumab + ipilimumab 用于中高危晚期 RCC 一线治疗，nivolumab + cabozantinib 和 pembrolizumab + lenvatinib 也均为先进展性 RCC 的一线标准参考；belzutifan 已用于既往接受过 PD-1/PD-L1 抑制剂和 VEGF-TKI 后的晚期 RCC。

第十一章 优势与局限

皮下 CDX
优势是最标准化、最适合高通量早筛和 PK/PD；局限是对肾脏微环境、转移和术后复发外推有限。

原位肾脏模型
优势是更接近真实器官环境，适合局部侵袭、血供、复发和自发转移研究；局限是建模技术要求高、通量低、批间差异更大。

转移模型
优势是可精准回答肺定植、骨微环境和晚期播散问题；局限是实验性模型不能完全替代自然病程。

同种免疫完整模型
优势是可评估完整免疫系统和 IO 联用；局限是鼠瘤与人瘤存在生物学差异，抗体交叉反应和靶点保守性需预先确认。

人源化模型
优势是适合验证人免疫依赖机制，尤其适用于双抗、TCE 和细胞治疗；局限是成本高、供者差异大、xGvHD 风险明显。

肾细胞癌动物模型的关键，不在于模型数量，而在于是否使用了最能回答当前问题的模型。对 ccRCC 小分子和 HIF-2α 项目，皮下模型足以完成第一轮排序；对转移、复发和围手术期项目，应尽快升级到原位和自发转移模型；对 VEGF/TKI 和免疫联合项目，则应坚持“同种原位优先于同种皮下”。整体建议采用“皮下早筛—原位验证—转移深化—免疫确认”的递进式路径，以提高模型结果对肾细胞癌临床开发的支持价值。