卵巢癌动物实验研究用户指南

第一章 指南总览

卵巢癌动物模型的选择，不能仅按“皮下、原位、转移”做技术分类，更应围绕研发问题、病理类型和疾病阶段进行分层。对卵巢癌项目而言，高等级浆液性卵巢癌是最核心的建模场景，研究重点通常集中在铂敏感与铂耐药转化、腹腔播散、网膜转移、腹水形成、微小残留病灶、复发维持治疗以及 FRα、DNA 损伤修复、ADC 和免疫治疗等方向。与多数实体瘤不同，卵巢癌的临床进展高度依赖腹腔内播散过程，因此腹腔播散模型和原位卵巢模型的重要性，通常高于单纯皮下模型。

从研发决策逻辑看，皮下异种移植模型更适合早期药效、剂量探索和 PK/PD；原位卵巢模型更适合回答器官微环境、局部侵袭和网膜转移问题；腹腔播散模型是评估腹膜种植、腹水和广泛腹腔转移的核心平台；若涉及免疫治疗、肿瘤微环境重塑、细胞因子、双抗、TCE 或 CAR-T/NK，则应进一步进入同种免疫完整模型或人源化模型。对卵巢癌而言，真正高价值的模型路线通常是“皮下早筛—原位/腹腔播散验证—复发/耐药深化—免疫确认”的递进式路径，而不是停留在单一皮下缩瘤结果。

第二章 卵巢癌细胞系库与疾病分层特征

2.1 高等级浆液性卵巢癌代表性细胞系

高等级浆液性卵巢癌是卵巢癌建模中的主流场景。常用细胞系包括 OVCAR3、OVCAR4、OVCAR5、Kuramochi、OVSAHO、Caov3。其中，OVCAR3 是最常用的经典卵巢癌模型之一，适合铂类、紫杉类、PARP 抑制剂联合方向及 FRα 相关研究；OVCAR4 和 OVSAHO 更适合 TP53、HRD 相关背景研究；Kuramochi 常被视为更接近高等级浆液性卵巢癌分子特征的人源模型之一，适合做机制研究和正交/原位建模。若项目目标是高等级浆液性卵巢癌，建议优先选用与该分型一致度更高的细胞系，而不是使用异质性过强、来源不够清晰的旧模型。

2.2 铂耐药与高侵袭代表性细胞系

铂耐药和腹腔播散是卵巢癌项目最常见的升级方向。常用模型包括 A2780 / A2780cis、SKOV3、OVCAR8、HeyA8、ES2。其中，A2780 适合标准铂类药效研究，A2780cis 常用于顺铂耐药研究；OVCAR8 和 HeyA8 具有较强腹腔种植和转移潜能，适合腹腔播散和复发方向；SKOV3 是应用广泛的高增殖模型，也适用于 HER2、FRα、ADC 和局部腹腔给药研究；ES2 侵袭性更强，适合高侵袭、快速播散和高恶性表型研究。若项目聚焦铂耐药、腹腔播散或高侵袭表型，不宜只用 OVCAR3 一类较“稳定”的模型，应增加 OVCAR8、HeyA8、ES2 或耐药衍生株并行验证。

2.3 FRα、PARP 与 ADC 相关选型逻辑

若项目是 FRα 方向，应优先选择 FRα 表达稳定且体内表达不易丢失的细胞系，如 OVCAR3、OVCAR4、部分 IGROV1 或 SKOV3 条件下模型，并在体外与在体成瘤后都确认靶点表达。若项目是 PARP 抑制剂、DNA 损伤修复或 HRD 方向，则应优先纳入 BRCA/HRD 背景更明确的模型，并设计铂类敏感、铂类维持和铂耐药三个层级。若项目是 ADC，尤其是 FRα、TROP2、NaPi2b 等方向，则除了分型之外，更应重视抗原表达均一性、体内稳定性和腹腔病灶中的真实可及性。

2.4 同种与免疫完整模型代表株

卵巢癌免疫完整模型中，ID8、ID8-luc、ID8-VEGF、ID8-Trp53-/-, ID8 衍生高转移亚株 是最常用的一组基础平台。ID8 模型最大的价值在于能够在免疫完整背景下重现腹腔播散、网膜转移和腹水形成，是卵巢癌免疫研究中最重要的同种系统之一。近年来，基于 ID8 的原位、高转移和特定驱动基因编辑模型进一步增强了其对高等级浆液性卵巢癌临床进展的模拟能力。若项目是免疫治疗、腹腔微环境或复发研究，ID8 系统通常优先于普通人源 CDX。

第三章 皮下异种移植模型（CDX）

皮下 CDX 是卵巢癌项目最稳健的早期药效平台，适合药效 PoC、剂量探索、PK/PD 关联和不同候选分子的横向排序。其优势是操作标准化、成瘤率高、批间一致性相对较好，适合快速判断候选药物是否具备基础抗肿瘤活性。其局限也非常明确：皮下模型几乎不能真实反映卵巢癌最关键的腹腔播散、网膜种植、腹水形成和局部器官微环境，因此不宜将皮下缩瘤结果直接外推为抗播散或抗复发能力。

3.1 高等级浆液性卵巢癌皮下 CDX

OVCAR3 / OVCAR4 / OVSAHO / Kuramochi / Caov3 + BALB/c nude 或 NSG
模型定位：适合高等级浆液性卵巢癌的小分子、细胞毒药、PARP 抑制剂、ADC 和基础靶向药早期筛选。
造模方法：常规皮下接种后，当肿瘤达到约 80–150 mm3 入组。
治疗周期：通常 2–4 周；若是维持治疗、PARP 联合或耐药研究，可延长至 4–8 周。
检测指标：TGI、RTV、终末瘤重、体重；机制终点可加入 Ki67、cleaved caspase-3、γH2AX、RAD51、FRα。
阳性药推荐：卡铂、紫杉醇、奥拉帕利、尼拉帕利；FRα 项目可引入 mirvetuximab soravtansine 作为高优先级临床映射参考。

3.2 铂耐药与高侵袭皮下 CDX

A2780cis / OVCAR8 / HeyA8 / SKOV3 / ES2 + BALB/c nude、NOD-SCID 或 NSG
模型定位：适合铂耐药、ADC、细胞毒药、联合策略和高侵袭项目的前期筛选。
特点：A2780cis 更适合顺铂耐药场景；OVCAR8 和 HeyA8 可为后续腹腔播散模型提供更自然的升级路径；SKOV3 与 ES2 更适合快速增殖、侵袭性和局部递药项目。
阳性药推荐：卡铂、紫杉醇、脂质体阿霉素；若项目面向铂耐药后治疗，可增加 mirvetuximab soravtansine 或其他 ADC 方向作为对照思路。

第四章 原位卵巢模型

原位卵巢模型比皮下模型更接近临床器官环境，能够更真实地呈现卵巢局部基质、血供、网膜转移和腹腔扩散前端过程。对需要回答“药物是否真正改变了卵巢原发灶向腹腔播散的能力”的项目，原位模型通常优先于皮下模型。其局限是手术操作要求高、通量低、批间差异大，对 luc 标记和活体影像依赖较强。

4.1 人源原位模型

OVCAR8-luc / HeyA8-luc / SKOV3-luc / ES2-luc + NSG 或 NOD-SCID
模型定位：适合卵巢器官微环境、局部侵袭、网膜转移、局部给药和复发研究。
造模方法：将 luc 标记肿瘤细胞接种于卵巢囊膜下或卵巢局部组织，利用 IVIS 监测原位肿瘤负荷及后续腹腔播散。
特点：OVCAR8-luc、HeyA8-luc 和 ES2-luc 原位模型更容易形成侵袭和腹腔播散；SKOV3-luc 适合靶向药、ADC 和局部给药研究。
检测指标：原位肿瘤负荷、IVIS、网膜转移、腹腔结节数、腹水、生存。

4.2 同种原位模型

ID8-luc / ID8-VEGF / ID8 高转移衍生株 + C57BL/6
模型定位：适合免疫治疗、腹腔微环境、网膜转移、腹水形成和局部免疫调控研究。
特点：ID8 原位模型是卵巢癌免疫研究的关键平台，可在免疫完整背景下模拟原发病灶与腹腔播散。部分高转移衍生 ID8 亚株在原位场景中进展更快，更适合中后期药效和耐药研究。
应用建议：若项目涉及 PD-1/PD-L1、STING、细胞因子、髓系调控或先天免疫激动剂，优先考虑 ID8 原位而不是皮下同种。

第五章 腹腔播散与腹水模型

卵巢癌最具特征性的模型类型不是尾静脉肺转移，而是腹腔播散模型。该模型能够直接评估腹膜种植、网膜定植、浆膜面转移、腹水形成和多部位腹腔病灶，是卵巢癌项目中最有转化意义的平台之一。对大多数晚期卵巢癌药物而言，腹腔播散模型的优先级往往高于单纯原位原发灶模型。

5.1 人源腹腔播散模型

OVCAR8-luc / HeyA8-luc / SKOV3-luc / ES2-luc / OVCAR3-luc + NSG 或 NOD-SCID
模型定位：用于评估腹膜播散、网膜转移、腹水形成、腹腔病灶缩减和腹腔内给药策略。
造模方法：腹腔注射 luc 标记细胞，监测 2–6 周，视细胞系而定。
特点：OVCAR8-luc、HeyA8-luc 和 ES2-luc 通常播散更快，适合快速药效验证；OVCAR3-luc 更适合高等级浆液性卵巢癌背景和较长期治疗设计；SKOV3-luc 适合 ADC 和靶向药方向。
检测指标：腹腔总生物发光信号、腹膜结节数、网膜重量、腹水量、PCI 类评分、生存。
阳性药推荐：卡铂 + 紫杉醇、脂质体阿霉素；FRα 方向可纳入 mirvetuximab soravtansine；PARP 方向可纳入奥拉帕利或尼拉帕利。

5.2 免疫完整腹腔播散模型

ID8 / ID8-luc / ID8-VEGF / 高转移 ID8 亚株 + C57BL/6
模型定位：用于免疫治疗、腹水微环境、髓系抑制、T 细胞浸润、复发和维持治疗研究。
特点：ID8 腹腔播散模型可形成腹膜结节、网膜病灶和腹水，是卵巢癌免疫完整研究的核心平台。高转移衍生 ID8 亚株和部分基因编辑版本可更快形成重度腹腔疾病，更适合中晚期药效研究。
检测指标：腹腔病灶负荷、腹水、免疫细胞谱、细胞因子、生存。
应用建议：若项目需要回答“免疫系统参与下，药物是否能抑制腹腔播散和腹水”，优先选此平台。

第六章 转移与特异器官模型

卵巢癌的远处转移虽不如腹腔播散常见，但在脑、肝、肺和网膜优势定植研究中仍具有价值。其中，网膜转移和腹膜表面种植在卵巢癌的模型体系中应视作最核心的“特异器官/特异部位转移”研究方向。若项目专门关注网膜趋向性、腹腔黏附或局部转移，则可使用具有更强网膜亲和性的衍生株。

6.1 网膜转移模型

OVCAR8-HM / ES2-HM / ID8 高转移亚株
模型定位：用于研究网膜嗜性、早期黏附、间皮细胞相互作用和转移抑制策略。
特点：通过 in vivo 选择获得的高转移亚株通常具有更强网膜定植和更早期广泛播散特征，适合评价抗转移和抗黏附策略。
检测指标：网膜结节负荷、腹膜播散范围、组织病理、EMT 和 ECM 相关标志物。

6.2 肝或肺定植模型

ES2 / SKOV3 / OVCAR8 衍生高侵袭株
模型定位：用于研究晚期远处转移和循环后定植。
造模方法：可采用脾内/门静脉模型评价肝定植，或尾静脉模型评价肺定植。
应用建议：这类模型在卵巢癌中不是首选平台，更适合特定机制问题或特殊项目补充，不应替代腹腔播散模型作为主要决策依据。

第七章 同种免疫完整模型

同种免疫完整模型在卵巢癌中的价值极高，因为卵巢癌项目里大量关键问题都与腹腔免疫环境、髓系抑制、T 细胞耗竭、腹水细胞因子和局部治疗相关。与人源 CDX 相比，同种模型不是更像人源肿瘤本身，而是更适合回答“完整免疫系统存在时药物是否还能成立”。

7.1 同种皮下模型

ID8 / ID8 衍生株 + C57BL/6
模型定位：适合免疫检查点、STING、先天免疫激动剂、细胞因子和联合治疗的早期筛选。
造模方法：皮下接种后在 50–100 mm3 入组。
治疗周期：通常 10–21 天。
检测指标：体积、生存、体重、流式免疫分型、IHC、空间免疫。
应用建议：适合免疫项目早筛，但若命中后不升级到腹腔播散或原位模型，通常不足以支持卵巢癌转化判断。

7.2 同种原位 / 腹腔模型

ID8-luc / ID8-VEGF / 高转移 ID8 亚株 + C57BL/6
模型定位：用于免疫治疗、腹腔微环境、腹水免疫学、复发和维持治疗研究。
特点：这是卵巢癌最重要的免疫完整平台之一。相较皮下模型，更能体现腹腔巨噬细胞、髓系细胞、T 细胞状态和局部免疫抑制网络。
检测指标：腹腔病灶负荷、腹水、CD8/Treg、髓系细胞谱、细胞因子、生存。
阳性药推荐：抗 PD-1/PD-L1、抗 VEGF 相关策略、铂类联合、PARP 联合和先天免疫调节剂。

第八章 人源化免疫模型

人源化模型适合回答普通 CDX 和同种模型都无法充分回答的问题，尤其是 FRα/CD3 双抗、TCE、CAR-T、CAR-NK、依赖人免疫系统效应的 ADC 或复杂联合策略。对卵巢癌而言，这类模型通常用于关键节点验证，而非高通量早筛。

8.1 huPBMC + 人源卵巢癌模型

模型定位：短周期免疫治疗筛选。
适用细胞：OVCAR3、OVCAR4、OVCAR8、SKOV3、HeyA8、ES2 等。
特点：建模快，适合短程 TCE、双抗、CAR-T/NK、细胞因子研究。
局限：xGvHD 风险高，治疗窗短，更适合短期药效与免疫激活读数。
检测指标：hCD45、hCD3、hCD8、hNK、细胞因子、肿瘤负荷、CRS/xGvHD 风险指标。

8.2 huHSC + 人源卵巢癌模型

模型定位：长周期人免疫重建、复杂联合和微环境机制研究。
特点：免疫系统重建更完整，适合研究持续性免疫治疗、耐药和微环境重塑；但建模周期长、成本高、供者差异大。
应用建议：适合进入候选药确认阶段后使用，或在必须解释复杂免疫机制时使用。

第九章 复发、维持治疗与耐药模型

卵巢癌项目中，复发和维持治疗研究的重要性显著高于很多实体瘤。若项目目标是维持治疗、微小残留病灶清除、铂后复发抑制或 PARP 联合，应避免只用短程皮下模型。更推荐采用原位或腹腔播散模型，在铂类诱导缓解后进入维持治疗阶段，或在手术减瘤/腹腔病灶缩减后观察复发。

推荐路线包括：
原位或腹腔播散建模后使用卡铂/紫杉醇诱导病灶下降，再转入奥拉帕利、尼拉帕利、抗血管生成药、ADC 或联合方案维持观察；
或使用 A2780cis、OVCAR8、HeyA8 耐药背景模型直接评估复发后治疗。
这类模型更接近卵巢癌临床“初治缓解—维持—复发”的真实路径。

第十章 项目升级路径建议

10.1 细胞毒药、靶向药与 ADC 项目

建议路径为：
皮下 CDX 早筛 → 腹腔播散模型验证腹膜/网膜场景 → 必要时进入原位模型确认器官相关性。
若项目是 ADC 或 FRα 方向，需尽早加入目标表达稳定、腹腔病灶可及性更高的模型，不能只依赖皮下缩瘤。

10.2 PARP、DNA 损伤修复与维持治疗项目

建议路径为：
HRD/BRCA 相关皮下 CDX 早筛 → 原位或腹腔播散模型建立后用铂类诱导缓解 → 进入维持治疗设计。
若项目涉及铂耐药逆转，应增加 A2780cis、OVCAR8 或 HeyA8 耐药/高侵袭模型。
临床映射上，可优先参考奥拉帕利、奥拉帕利联合贝伐珠单抗，以及尼拉帕利在一线维持和复发维持场景中的应用。

10.3 FRα 与 ADC 项目

建议路径为：
FRα 高表达皮下模型确认基础药效 → 腹腔播散模型验证广泛腹腔病灶中的活性 → 必要时进入人源化模型评价免疫相关机制。
当前 FRα 方向的高优先级临床映射参考药为 mirvetuximab soravtansine，适合在 FRα 阳性、铂耐药场景下作为参考对照。

10.4 免疫治疗项目

建议路径为：
同种皮下早筛 → ID8 原位或腹腔播散模型验证 → 必要时进入人源化模型。
卵巢癌免疫项目若停留在皮下模型，通常无法充分覆盖腹水、腹腔髓系抑制和局部免疫微环境，应尽早升级。

第十一章 检测指标与阳性药体系

11.1 通用检测指标

皮下模型核心终点：TGI、RTV、终末瘤重、体重。
原位模型核心终点：原位肿瘤负荷、网膜转移、腹腔结节、IVIS、生存。
腹腔播散模型核心终点：腹膜结节数、网膜重量、腹水量、PCI 类评分、生存。
免疫模型机制终点：CD8、Treg、髓系细胞谱、细胞因子、腹水细胞学、人免疫重建率。
机制终点：FRα、Ki67、cleaved caspase-3、γH2AX、RAD51、CD31、F4/80。

11.2 阳性药推荐

初治 / 通用：卡铂、顺铂、紫杉醇、脂质体阿霉素。
抗血管生成：贝伐珠单抗。
PARP / 维持治疗：奥拉帕利、尼拉帕利；HRD 阳性一线维持可参考奥拉帕利联合贝伐珠单抗。
FRα / ADC：mirvetuximab soravtansine。
免疫相关：抗 PD-1/PD-L1 更适合同种或人源化模型评价。
其中，mirvetuximab soravtansine 适合作为 FRα 阳性、铂耐药卵巢癌方向的临床映射参考；尼拉帕利当前一线维持适应症以 HRD 阳性高级别上皮性卵巢癌为主，奥拉帕利则可用于 BRCA 突变一线维持及 HRD 阳性联合贝伐珠单抗维持场景。

第十二章 优势与局限

皮下 CDX
优势是最标准化、最适合高通量早筛和 PK/PD；局限是对腹腔播散、腹水和网膜转移外推极弱。

原位卵巢模型
优势是更接近卵巢器官环境，适合局部侵袭和原发灶向腹腔扩散研究；局限是操作复杂、通量低、对影像依赖强。

腹腔播散模型
优势是最能反映卵巢癌临床自然病程中的腹膜种植、网膜转移和腹水形成，是卵巢癌最重要的高价值模型之一；局限是定量复杂、批间差异较大，且对实验经验要求高。

同种免疫完整模型
优势是可评价完整免疫系统和腹腔微环境，特别适合免疫治疗与 TME 研究；局限是鼠瘤与人瘤存在物种差异。

人源化模型
优势是可验证人免疫依赖机制，适合双抗、TCE 和细胞治疗；局限是成本高、供者差异大、xGvHD 风险高、统计噪声更大。

卵巢癌动物模型的核心，不在于使用了多少模型，而在于是否使用了最能回答当前问题的模型。对卵巢癌项目而言，腹腔播散、网膜转移、腹水形成、维持治疗和复发路径，决定了其模型体系与其他实体瘤明显不同。若项目只是早期筛选，皮下模型足够高效；若要做真正有转化意义的卵巢癌研究，则必须尽早进入原位卵巢或腹腔播散平台。整体上，建议采用“皮下早筛—原位/腹腔播散验证—复发/维持深化—免疫确认”的递进路径，以提高模型结果对后续临床开发的支持价值。