以科学问题为导向，构建从机制研究到模型验证再到转化评估的系统研究路径

南京博恩生物技术有限公司面向高校、科研院所、医药企业与生物技术企业，提供覆盖胚胎干细胞、诱导多能干细胞、组织干细胞、间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞、肿瘤干细胞、定向分化、类器官构建、药物筛选、再生修复及临床前转化研究的系统化服务。公司不仅提供实验执行服务，更围绕具体科学问题开展研究路线设计，帮助客户从单项检测推进到完整、可靠、可解释、可发表、可转化的研究证据体系建设。

干细胞研究正在从单纯的细胞身份确认，逐步走向重编程机制解析、分化路径控制、疾病模型构建、药效评价与细胞产品前研究等更高层级的系统研究。高价值研究通常需要进一步回答以下关键问题：细胞来源是否明确，扩增是否稳定，分化潜能是否成立，功能是否可验证，模型是否可重复，结果是否具备转化价值。南京博恩基于长期干细胞研究经验，围绕这些核心判断节点，为不同研究目标匹配相应的细胞体系、实验路径与交付标准，帮助客户提升项目成功率与研究深度。

导读

一、我们能解决的核心问题
二、博恩干细胞研究优势
三、项目立项前建议先回答的四个问题
四、核心服务体系
五、交付逻辑与成果形式
六、服务流程
七、博恩优势
附录A 典型研究方向与推荐设计思路
附录B 常见研究误区与关键卡点
附录C 不同干细胞的典型研究场景
附录D 不同干细胞相关关键通路
附录E 不同干细胞常用标志物
附录F 平台支撑与技术配套

一、我们能解决的核心问题

干细胞研究项目在立项和推进过程中，常会遇到几个共性问题：当前使用的细胞体系是否合适，表型结果是否足以支持结论，分化或建模体系是否稳定，功能验证是否充分，以及研究结果究竟停留在基础研究层面，还是具备进一步向药物筛选、再生修复或临床前研究延伸的可能。

南京博恩的核心价值，不只体现在完成若干实验项目，更体现在帮助客户在项目早期明确研究目标、识别关键卡点、筛选合适技术路线，并通过多层次验证提升研究结论的扎实程度。

1.1 基础研究项目支持重点

对于基础研究项目，公司重点支持发育机制、干性维持、重编程调控、谱系决定与细胞命运转变等方向，帮助客户建立更清晰的机制研究路径。

1.2 疾病研究项目支持重点

对于疾病研究项目，公司重点支持患者来源模型构建、疾病表型重建、药物响应评价与机制验证，帮助客户提高模型解释力和应用价值。

1.3 再生与转化项目支持重点

对于再生与转化项目，公司重点支持细胞功能评估、旁分泌与免疫调节研究、工程化改造、质量控制与临床前可行性分析。通过打通“研究问题—模型体系—验证路径—交付结果”全链路，公司帮助客户获得更清晰的项目路线和更稳定的研究输出。

二、博恩干细胞研究优势

2.1 以功能性证据支撑研究结论

在干细胞研究中，仅凭 OCT4、SOX2、NANOG、CD73、CD90、CD105 等分子或表型指标，通常不足以支撑完整结论。多能相关标志物阳性，仅能说明细胞具备一定的表型特征；是否真正具备多谱系分化能力，还需要进一步验证。MSC 表型符合常用标准，也仍需结合免疫调节和修复能力进行判断。肿瘤干细胞相关标志物阳性，也需要结合肿瘤起始能力等功能证据综合评估。南京博恩强调以功能性证据支撑分子层判断，帮助项目避免停留在表型成立但结论支撑不足的阶段。

2.2 强调“来源—干性—分化—功能—转化”五层证据链

公司将高质量干细胞研究概括为五层核心证据链：第一层为细胞来源是否清楚，第二层为干性或未分化状态是否成立，第三层为是否具备预期分化潜能，第四层为分化后是否形成相应功能，第五层为是否具备疾病模型价值、药物筛选价值或转化价值。不同项目可根据研究目标选择证据深度，但研究设计需要明确所处层级，避免实验较多而结论不聚焦。

2.3 区分表型层干性、功能层干性与转化可行性

很多研究中的争议，源于将不同层级的“干性”混为一谈。南京博恩在方案设计中，会明确区分表型层面的干性、功能层面的干性，以及面向产品开发和临床前研究所要求的一致性、安全性和可放大性。这种区分有助于提升基础研究结论的严谨性，也有利于企业客户在早期评估项目的转化潜力。

2.4 支持从机制研究到应用研究的连续推进

干细胞研究的价值，不仅体现在单点实验结果，更体现在是否能够形成连续、可推进的研究路径。南京博恩可围绕同一项目，从细胞建立与鉴定、干性与分化评估、功能验证、疾病模型构建、药物筛选评价，到工程化优化与临床前支持进行分层设计，帮助客户减少重复试错，提高项目推进效率。

三、项目立项前建议先回答的四个问题

3.1 研究重点是细胞身份，还是细胞功能

如果项目目标是初步确认某群细胞具备干细胞样特征，那么基础表型、标志物检测和培养状态评估通常即可满足需求；如果研究目标是高质量机制研究或功能研究，则还需要进一步明确细胞是否具备稳定扩增、自我更新、定向分化和功能输出能力。南京博恩会根据客户目标，帮助区分“身份确认型研究”与“功能验证型研究”，从源头提升方案匹配度。

3.2 研究对象更适合多能干细胞体系，还是组织或成体干细胞体系

多能干细胞更适合发育研究、生殖层形成研究、复杂组织分化和疾病建模；组织干细胞更适合成熟组织稳态、损伤修复和患者来源类器官模型；MSC、HSC、NSC 等则分别对应免疫调节、造血重建、神经修复等不同方向。细胞体系的选择，应以最终研究问题为导向，而不应仅依据实验习惯。

3.3 项目重点是分化能力，还是疾病建模与药物筛选能力

有些项目重视目标细胞的形成效率和成熟度，有些项目则更关注患者特异性疾病表型能否稳定重建，以及候选药物对模型的响应是否可靠。这两类项目在模型选择、评价指标和结果解释逻辑上存在明显差异。南京博恩会根据项目目标，优先明确项目究竟聚焦分化研究还是模型研究，从而减少无效实验设计。

3.4 项目定位是研究级使用，还是转化级准备

许多细胞体系在基础研究中具有较高价值，但距离转化应用仍可能存在基因组稳定性、免疫原性、批次一致性和肿瘤形成风险等差距。对于有转化需求的项目，公司会在早期引入一致性、安全性与工艺可行性评估思路，帮助客户尽早识别后续放大和申报过程中的关键问题。

四、核心服务体系

4.1 多能干细胞研究服务

针对 ESC 和 iPSC 项目，公司可提供细胞培养、重编程、干性维持、定向分化、基因编辑、疾病建模与药物筛选平台构建等系统服务。公司特别关注 iPSC 项目中的重编程质量、克隆稳定性、遗传安全性、分化一致性和下游应用适配性，帮助客户将多能性优势转化为可用的研究模型和成果输出。

4.2 组织干细胞与成体干细胞研究服务

针对肠道、肝脏、皮肤、肺、肾、乳腺等组织来源干细胞项目，公司可开展分离培养、维持扩增、谱系分化、类器官构建和组织稳态研究。此类项目中，公司重点关注组织来源细胞的谱系边界、扩增稳定性、类器官形成能力及疾病场景中的适用性，帮助客户更准确地选择组织稳态研究路径或患者来源模型路径。

4.3 间充质干细胞研究服务

针对骨髓、脂肪、脐带、胎盘等来源 MSC 项目，公司可提供分离培养、表型鉴定、成骨成脂成软骨分化、免疫调节研究、旁分泌与细胞外囊泡研究、工程化改造及再生修复评价。与仅停留在表型鉴定的常规方案相比，公司更加重视 MSC 项目中的功能性判定，尤其关注免疫调节能力、分泌组特征、细胞外囊泡活性和批次间一致性，帮助客户区分表型型 MSC 与功能型 MSC。

4.4 造血干细胞研究服务

针对 HSC 项目，公司可提供造血干细胞生物学研究、外周血、骨髓、脐血来源 HSC 扩增、造血分化、归巢与植入相关机制研究，以及移植配套和临床前支持。公司重点关注 HSC 项目中的长期重建能力、归巢能力和体外扩增效果，帮助客户从单纯标志物检测推进到真正具有造血意义的功能研究。

4.5 神经干细胞与神经再生研究服务

针对 NSC 和 iPSC 来源神经细胞项目，公司可提供神经干细胞培养、神经元与胶质细胞定向分化、神经退行性疾病模型构建、神经网络功能配套研究及修复评价。公司强调此类项目不应仅停留在分化标志物层面，还应尽可能引入成熟度、整合性和功能性评价，从而增强研究对疾病机制和药效研究的支撑能力。

4.6 肿瘤干细胞研究服务

针对 CSC 项目，公司可提供肿瘤干性相关标志物分析、球体培养、成瘤相关评价、干性与可塑性联动研究、耐药机制研究、微环境研究及抗 CSC 药效评价。公司关注的重点不止是若干标志物是否阳性，更重视其是否真正对应肿瘤起始、耐药和复发相关的功能状态，因此会综合评估肿瘤起始能力、治疗耐受、可塑性和微环境联动。

4.7 类器官与高级模型研究服务

针对 PSC 类器官、组织干细胞类器官及患者来源类器官项目，公司可提供类器官构建、长期维持、疾病表型重建、药物响应评价，以及类器官与免疫、基质等共培养体系设计。公司特别关注类器官项目中的结构稳定性、细胞组成合理性、功能成熟度和药物筛选适用性，帮助客户将“能够形成的类器官”升级为“可重复、可解释、可用于研究决策的高级模型”。

五、交付逻辑与成果形式

南京博恩的项目交付，不仅是一份实验结果汇总，更是围绕客户研究目标形成的系统化研究成果。根据项目类型和深度，可交付内容包括阶段性实验结果、PDF 版结果报告、完整终版报告、原始数据、统计图表、图注说明及整理后的发表级素材。对于更高层级项目，公司还可围绕模型构建逻辑、关键结论链和后续延伸建议形成更具研究价值的系统输出。

5.1 面向基础科研客户的交付价值

对于基础科研客户，交付内容重点服务于课题推进、论文撰写和基金申报，强调研究逻辑清晰、数据链条完整和结果可复用性。

5.2 面向企业客户的交付价值

对于企业客户，交付内容重点服务于研发决策、候选路线筛选和产品前研究判断，更强调可评估性、可追溯性和后续推进价值。

六、服务流程

项目启动前，客户可提供研究背景、研究目的、细胞类型、疾病方向、预期研究路径及参考文献。南京博恩将围绕项目目标进行评估，重点判断当前问题更适合采用何种细胞体系，是否需要优先区分表型层干性与功能性干性，是否应引入定向分化、类器官、共培养、药物筛选或动物实验联动，以及应采用哪些核心实验与交叉验证方式。

在确认方案后，项目将依次进入方案细化、正式报价、合同签订、预付款支付、实验开展、中期沟通、结果整理、PDF 版报告提交、尾款支付和完整资料交付等环节。通过前期评估、中期把控和终期交付的完整流程管理，公司帮助客户获得更加稳定、清晰、可追溯的项目支持体验。

六、服务流程

6.1 前期评估

围绕研究目标、细胞体系、疾病方向和预期路径开展前期评估，明确项目重点、关键风险点和推荐技术路线。

6.2 方案确认与执行

在完成方案细化、报价与合同流程后，项目正式进入实验执行阶段，并在过程中结合中期沟通机制进行动态把控。

6.3 结果整理与最终交付

项目完成后，公司将按照既定交付标准提供阶段性结果、终版报告及配套资料，确保研究成果具备实际使用价值。

七、博恩优势

南京博恩生物技术有限公司致力于为高校、科研院所、医药企业和生物技术企业提供高质量、成体系的干细胞研究支持。公司不仅关注实验是否完成，更关注项目是否建立起真正有说服力的研究逻辑和证据闭环。无论是发育与分化机制研究、疾病模型构建、再生修复、免疫调节、造血重建、神经再生、肿瘤耐药，还是类器官和工程化细胞研究，公司均可围绕客户的真实科学问题，设计更清晰、更可靠、更适合发表与转化的研究方案。

附录A 典型研究方向与推荐设计思路

A1 发育与分化机制研究

对于关注细胞命运建立、谱系决定和分化调控的项目，通常推荐以 PSC 体系结合时序分化设计和关键节点读出指标开展研究。此类项目的重点，不仅在于目标细胞是否形成，还在于分化路径是否清晰、过程是否稳定、节点机制是否可解释。

A2 遗传病与罕见病建模研究

对于患者来源疾病建模项目，更关注模型是否能够稳定重建疾病表型、对照体系是否合理、基因型与表型之间是否存在明确对应关系。此类项目常采用患者来源 iPSC 或患者来源类器官体系，并结合分化模型、表型评价和药物反应测试进行系统设计。

A3 再生修复与免疫调节研究

对于再生修复类项目，通常围绕 MSC、组织干细胞或分化细胞体系展开，并重点评估其对炎症调节、组织修复和功能恢复的影响。此类项目中，旁分泌与细胞外囊泡往往是关键作用机制，因此通常需要将功能验证与分泌组分析联合考虑。

A4 造血重建与移植研究

对于造血方向项目，研究重点包括 HSC 扩增效率、长期造血重建能力、归巢与植入效果，以及免疫重建价值。此类项目的实验设计通常需要从基础表型检测进一步延伸到功能性重建评价，才能形成更具研究价值的结论。

A5 神经退行性疾病与神经修复研究

对于神经系统项目，通常从细胞分化成熟度、疾病相关表型、网络功能和药物响应四个层面进行设计。通过将 iPSC 神经模型、NSC 体系或脑类器官模型结合，可更有效支撑疾病机制研究和候选药物筛选。

A6 肿瘤耐药与复发研究

对于肿瘤项目，更重视肿瘤干性、细胞可塑性和上皮间质转化联动的综合研究思路。相较于单独进行标志物检测，结合球体形成、药敏比较、微环境干预和状态转换分析，更有助于解释治疗失败和复发机制。

A7 细胞产品前研究与临床前准备

对于面向企业研发和产品化推进的项目，通常需要在研究早期引入一致性、安全性、遗传稳定性和工艺可行性评价，以便尽早发现转化中的潜在问题，降低后期因质量控制和安全性不足而导致路线受阻的风险。

附录B 常见研究误区与关键卡点

B1 常见问题概述

干细胞研究中常见的问题，并不一定来自实验数量不足，更常见的情况是关键判断不够准确。多能相关标志物表达上升，仅说明细胞在某些分子层面发生变化；是否具备真正多能性，仍需要进一步验证。MSC 表型一致，也仍需评估不同批次是否具备相近修复效果；类器官能够形成，也还需要判断模型是否稳定、可重复和适合药物筛选；CSC 相关标志物阳性，也需要进一步验证是否对应真正与复发相关的肿瘤干性状态。

B2 关键卡点识别思路

南京博恩在项目设计中，会优先识别当前最缺失的是哪一层证据，包括细胞来源层证据、干性层证据、分化层证据、功能层证据或转化层证据。这样的方案设计方式有助于客户减少重复试验，提升结论强度与研究效率。

附录C 不同干细胞的典型研究场景

C1 胚胎干细胞与诱导多能干细胞的研究场景

C1.1 基础发育与多能性维持研究

ESC 和 iPSC 适合用于研究多能性维持、胚层形成、细胞命运决定和重编程调控等基础问题。此类项目的重点通常在于未分化状态是否稳定、转录因子网络是否完整、不同培养体系是否影响细胞状态，以及特定调控因子如何驱动细胞由一种状态向另一种状态转变。

C1.2 定向分化与成熟度评价研究

当项目目标是获得心肌细胞、神经细胞、肝细胞、胰岛细胞等目标谱系时，PSC 体系是最常见的起点。此类研究的重点包括分化效率、分化过程可重复性、细胞成熟度、批次差异可控性，以及所得细胞是否具备后续功能研究价值。

C1.3 疾病模型与药物筛选研究

患者来源 iPSC 特别适合遗传病、罕见病和复杂疾病相关机制研究。其核心研究场景包括疾病表型重建、基因修复对照、候选药物响应比较和个体化治疗策略评估。

C1.4 细胞治疗与工程化前研究

PSC 还可用于细胞治疗候选产品的早期研发，包括基因编辑细胞构建、通用型细胞制备、规模化培养评估和安全性前移研究。该类项目更强调遗传稳定性、残留未分化细胞风险、肿瘤形成风险和工艺放大一致性。

C2 组织干细胞的研究场景

C2.1 组织稳态与损伤修复研究

组织干细胞适合用于研究肠道、皮肤、肺、肝、肾、乳腺等组织内干细胞或祖细胞如何参与日常更新、损伤修复和屏障维护。

C2.2 患者来源类器官与疾病模型研究

组织干细胞是构建患者来源类器官的重要基础。此类场景尤其适合肠道疾病、肝胆疾病、呼吸系统疾病和肿瘤相关研究。

C2.3 再生医学与组织工程研究

在部分项目中，组织干细胞还可用于组织修复和再生医学研究，例如上皮修复、腺体重建、组织屏障恢复和生物材料联合修复等。

C3 间充质干细胞的研究场景

C3.1 免疫调节与炎症控制研究

MSC 最常见的研究场景之一是炎症调节和免疫重塑。项目通常聚焦 MSC 是否通过细胞因子、趋化因子、外泌体及其他旁分泌成分抑制炎症、调节 T 细胞或巨噬细胞状态，并改善局部微环境。

C3.2 再生修复与组织保护研究

MSC 在骨、软骨、肌腱、皮肤、心肌、肝脏等组织修复场景中应用广泛。研究重点通常包括旁分泌、抗凋亡、促血管生成和组织保护作用是否稳定成立。

C3.3 MSC 来源细胞外囊泡与无细胞治疗研究

随着无细胞治疗研究发展，MSC 来源细胞外囊泡已成为重要研究方向。相关项目重点通常包括细胞外囊泡分离纯度、内容物特征、递送效率、功能效应和剂量体系建立。

C3.4 工程化 MSC 与增强型功能研究

针对部分转化项目，MSC 还可进行基因工程改造或预处理增强，以提升其归巢能力、免疫调节能力或局部修复效果。

C4 造血干细胞的研究场景

C4.1 造血层级与自我更新研究

HSC 是研究造血系统发生、维持与分层的经典模型。此类研究通常关注长期 HSC、短期 HSC 和祖细胞群体之间的关系，以及不同信号如何影响静息、自我更新和谱系分化平衡。

C4.2 归巢、植入与移植重建研究

HSC 研究的核心应用场景之一是归巢、植入和长期造血重建。此类项目通常需要结合移植模型，评估细胞进入骨髓微环境的能力、植入效率和长期重建效果。

C4.3 体外扩增与临床前优化研究

由于 HSC 体外扩增始终是领域难点，围绕扩增体系优化、细胞状态维持、移植后重建保留和工艺条件筛选的研究场景十分常见。

C5 神经干细胞的研究场景

C5.1 神经发生与谱系分化研究

NSC 适合研究神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的发生与分化。此类项目多聚焦神经发育过程、谱系决定节点、发育异常及细胞命运转变机制。

C5.2 神经退行性疾病模型研究

NSC 和 iPSC 来源神经细胞广泛用于阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化、癫痫和神经发育障碍等模型研究。

C5.3 神经损伤修复与网络功能研究

在损伤修复相关项目中，NSC 研究除关注细胞存活和分化外，还应关注突触整合、局部微环境调节、炎症反应改善和网络功能恢复。

C6 肿瘤干细胞的研究场景

C6.1 肿瘤起始与可塑性研究

CSC 研究首先适合回答肿瘤中是否存在能够驱动起始、生长和异质性维持的细胞群体。

C6.2 耐药、复发与最小残留病灶研究

在肿瘤治疗研究中，CSC 常被用于解释耐药、复发和最小残留病灶持续存在的原因。

C6.3 抗 CSC 药效与联合治疗研究

针对转化和药物筛选项目，CSC 还常用于评价候选药物是否能够抑制球体形成、降低肿瘤起始能力或削弱耐药相关状态。

附录D 不同干细胞相关关键通路

D1 胚胎干细胞与诱导多能干细胞相关关键通路

D1.1 多能性维持通路

PSC 的核心调控网络围绕 OCT4、SOX2、NANOG 展开，但其稳定维持高度依赖上游信号。小鼠 naive 状态 ESC 更常依赖 LIF/STAT3 通路维持自我更新，并通过抑制 MEK/ERK 和 GSK3 相关信号帮助维持基础状态。人源 PSC 则更常处于 primed 样状态，通常依赖 FGF2、Activin A、Nodal 和 TGF-β/SMAD2/3 信号维持未分化状态。

D1.2 分化决定与状态转换通路

Wnt/β-catenin、BMP/SMAD、FGF/ERK 和 Hippo/YAP 等通路共同参与 PSC 状态转换和谱系决定。

D1.3 代谢与存活相关通路

PI3K/AKT/mTOR、AMPK 和线粒体相关代谢通路对 PSC 增殖、存活和分化潜能具有重要影响。

D2 组织干细胞相关关键通路

D2.1 稳态维持通路

组织干细胞高度依赖其所处微环境。以肠道干细胞为代表，Wnt/R-spondin/LGR5 轴是维持隐窝干性和增殖能力的核心信号，Notch 通路则参与吸收型与分泌型谱系分化平衡。

D2.2 修复与再生通路

EGF/MAPK、YAP/TAZ、TGF-β 和炎症相关信号在损伤修复期尤为关键。

D2.3 类器官构建相关通路

在类器官培养体系中，Wnt、R-spondin、Noggin、EGF 等因子常作为基础培养核心成分。

D3 间充质干细胞相关关键通路

D3.1 分化相关通路

MSC 的成骨、成脂和成软骨分化高度依赖 BMP/TGF-β/SMAD、Wnt/β-catenin、PPARγ 和 RUNX2 相关调控网络。

D3.2 免疫调节与旁分泌相关通路

JAK/STAT、NF-κB、IDO 相关通路、PGE2 相关信号以及 TNF-α、IFN-γ 刺激后形成的许可化反应，均与 MSC 免疫调节功能密切相关。

D3.3 迁移与修复相关通路

PI3K/AKT、MAPK/ERK、SDF-1/CXCR4、HIF-1α 和 VEGF 相关信号与 MSC 归巢、迁移、耐受和促修复效应密切相关。

D4 造血干细胞相关关键通路

D4.1 静息维持与自我更新通路

HSC 长期维持能力与 SCF/c-KIT、TPO/MPL、Notch、Wnt、FOXO 和 TGF-β 等通路密切相关。

D4.2 归巢与骨髓微环境相关通路

CXCL12/CXCR4 轴是 HSC 归巢至骨髓微环境的经典通路。

D4.3 扩增与应激相关通路

mTOR、活性氧调控、DNA 损伤应答和炎症信号会影响 HSC 扩增质量与功能保留。

D5 神经干细胞相关关键通路

D5.1 干性维持通路

Notch 是 NSC 维持未分化状态的核心通路之一，可抑制过早神经元分化并帮助维持祖细胞库。

D5.2 神经发生与谱系分化通路

Wnt、SHH、BMP 和 FGF/EGF 相关信号共同参与 NSC 向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的分化。

D5.3 成熟与功能相关通路

mTOR、Ca2+ 信号、突触可塑性相关信号和代谢重编程通路在神经元成熟、轴突生长和网络整合中具有重要作用。

D6 肿瘤干细胞相关关键通路

D6.1 干性维持与自我更新通路

CSC 常见的核心通路包括 Wnt/β-catenin、Notch 和 Hedgehog。

D6.2 可塑性、上皮间质转化与耐药通路

TGF-β、上皮间质转化相关转录因子网络、PI3K/AKT/mTOR、NF-κB 和 YAP/TAZ 常参与 CSC 形成和维持。

D6.3 缺氧与代谢重塑通路

HIF-1α、糖酵解增强、活性氧调节和脂代谢重塑常与 CSC 耐受和肿瘤复发能力相关。

附录E 不同干细胞常用标志物

说明：不同干细胞的标志物应理解为常用识别与分群线索，不能单独作为细胞定义的唯一依据。标志物组合受种属、发育阶段、培养状态、组织来源和实验平台影响较大，实际研究中应结合功能实验、分化能力、稳定性和转录组特征综合判断。

E1 胚胎干细胞与诱导多能干细胞常用标志物

E1.1 人源 PSC 常用标志物

人源 ESC 和 iPSC 常见核内标志物包括 OCT4、SOX2、NANOG；常见表面标志物包括 SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81；碱性磷酸酶活性也常用于辅助判断未分化状态。

E1.2 小鼠 PSC 常用标志物

小鼠 ESC 常见核内标志物包括 Oct4、Sox2、Nanog；表面标志物更常见 SSEA-1 阳性。研究中还常结合 Klf4、Esrrb、Rex1 等 naive 状态相关分子进行辅助判断。

E1.3 应用提示

PSC 项目中，不建议仅凭少数标志物判定真正多能性成立，通常仍需结合三胚层分化潜能、克隆形成能力、连续传代稳定性及必要的遗传稳定性评价。

E2 组织干细胞常用标志物

E2.1 总体原则

组织干细胞没有完全通用的统一标志物体系，必须按组织来源具体判断。

E2.2 肠道干细胞常用标志物

小鼠肠道干细胞常用标志物包括 Lgr5、Olfm4、Ascl2、Sox9、Axin2；人源肠道干细胞研究中，LGR5、OLFM4、SMOC2、EPCAM 等较为常见。

E2.3 其他组织干细胞研究提示

皮肤、肺、肝、乳腺、肾等组织的干细胞标志物组合差异较大，具体选择需要服从组织类型和研究目的。

E3 间充质干细胞常用标志物

E3.1 人源 MSC 常用标志物

根据常用标准，人源 MSC 通常表现为 CD73、CD90、CD105 阳性，同时 CD34、CD45、CD14 或 CD11b、CD19 或 CD79a 以及 HLA-DR 阴性。

E3.2 小鼠 MSC 常用标志物

小鼠 MSC 常见阳性标志物包括 Sca-1、CD29、CD44、CD90，在部分体系中也会检测 CD73、CD105；阴性筛除常包括 CD45、CD11b、Ter119 等。

E3.3 应用提示

MSC 研究中，标志物更适合用于排除非目标细胞并辅助识别 MSC 群体，不能替代免疫调节、分化潜能和修复能力评价。

E4 造血干细胞常用标志物

E4.1 人源 HSC 常用标志物

人源 HSC 和 HSPC 研究中，常见富集策略为 CD34 阳性群体进一步分层，较常见的 HSC 表型组合包括 CD34 阳性、CD38 阴性、CD90 阳性、CD45RA 阴性，并可结合 CD49f、CD133 等进一步富集长期重建能力更强的亚群。

E4.2 小鼠 HSC 常用标志物

小鼠 HSC 研究中，经典策略是 Lin 阴性、Sca-1 阳性、c-Kit 阳性，即 LSK 群体。若进一步富集长期 HSC，常结合 CD150 阳性、CD48 阴性。

E4.3 应用提示

HSC 项目中，标志物分选只能回答富集了什么样的细胞群，真正关键的问题仍是长期造血重建和多谱系重建能力是否成立。

E5 神经干细胞常用标志物

E5.1 人源 NSC 常用标志物

人源 NSC 常用标志物包括 SOX2、NESTIN、PAX6、MSI1。部分早期神经祖细胞还可表达 FABP7、VIM 等。

E5.2 小鼠 NSC 常用标志物

小鼠 NSC 常用标志物包括 Sox2、Nestin、Pax6 和 Musashi1。随着分化推进，还可联合 Tuj1、Map2、Gfap、Olig2 等判断神经元和胶质分化方向。

E5.3 应用提示

NSC 研究应注意，干细胞标志物阳性仅说明细胞具备一定前体特征，是否形成具有功能的神经细胞，还需结合电生理、网络活动和成熟度评价。

E6 肿瘤干细胞常用标志物

E6.1 人源 CSC 常用标志物

CSC 标志物高度依赖癌种和模型背景，并不存在全肿瘤通用单一标志物。常见分析对象包括 CD133、CD44、EPCAM、ALDH1A1、LGR5、CD24、ABCG2 等。

E6.2 小鼠肿瘤模型中的 CSC 分析

在小鼠模型中，CSC 研究常结合 Sca-1、CD44、CD24、ALDH 活性、侧群细胞特征以及谱系追踪结果进行分析。

E6.3 应用提示

CSC 项目中，标志物只能作为候选富集线索，不能替代肿瘤起始潜能、耐药能力和复发相关功能验证。

附录F 平台支撑与技术配套

F1 分子与蛋白分析平台

qPCR 和 Western blot 适合开展关键标志物和信号通路层分析，帮助客户判断分子变化趋势。

F2 形态与空间观察平台

荧光显微镜与共聚焦平台适合观察分化状态、类器官结构与空间定位。

F3 细胞分析与功能评价平台

流式细胞术适合开展细胞纯度和异质性分析；功能实验平台可支持分化、迁移、分泌、修复和药物响应等功能性评价。

F4 代谢与安全性评估平台

线粒体与代谢平台有助于分析分化成熟度与功能状态；安全性评估配套可用于遗传稳定性、肿瘤形成风险和批次一致性评价。

F5 多平台联合验证思路

与单一技术平台服务不同，南京博恩更强调多平台联合验证。公司不主张用单一分子指标替代功能结论，也不主张用单次实验结果替代系统证据，而是根据项目需求将分子层、细胞层、组织层和功能层数据整合起来，提高结果的可靠性和解释深度。