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一.模型背景

肺纤维化疾病病变主要侵犯肺间质和肺泡腔,包括肺泡上皮细胞、毛细血管内皮细胞、基底膜以及血管、淋巴管周围的组织,最终引起肺间质的纤维化,导致肺泡及毛细血管功能的丧失。间质性肺炎和肺纤维化是对同一类疾病的不同描述方式,间质性肺炎是病理学上的一个分类名称,而肺纤维化是在影像学和临床使用的疾病名称。 

目前特发性肺纤维化(IPF)的发病机制仍不明确,目前公认的发病机制理论假说是上皮细胞假说。上皮细胞损伤导致炎症介质的分泌,并触发血小板活化,从而增强血管通透性,以募集白细胞。这些炎症细胞释放促纤维化细胞因子,如TGF-β1,介导成纤维细胞的活化和募集,以及它们分化成肌成纤维细胞,并随后释放细胞外基质(ECM)成分以促进伤口愈合。

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生理条件下,纤维生成是对组织损伤的反应,并形成伤口修复过程的一部分,参与恢复稳态。伤口修复通常由上皮损伤引起,导致凝血和炎症级联反应的激活。这反过来导致成纤维细胞的激活、募集和增殖,这些细胞负责ECM成分的释放。在最后的重塑阶段,伤口区域得到了修复,恢复了正常的组织结构和结构完整性。在与IPF相关的纤维化过程中,伤口修复过程的任何阶段都可能发生失调,导致瘢痕组织的不可逆积累。


一.造模方法


本研究选用SD大鼠或者C57小鼠,通过博来霉素(5mg/kg)或者脂多糖(5mg/kg)气管内给药,建立特发性肺纤维化模型;检测阳性药吡非尼酮及化合物对特发性肺纤维化大鼠的影响。


造模方法:


1.麻醉动物,仰卧固定于实验台上;


2.颈部去毛后碘伏消毒,切开皮肤,逐层暴露气管;


3.将微量注射器经两气管软骨环间隙朝向心端刺入气管,回抽无阻力后,注入LPS溶液或者BLM溶液;


4.手术完毕后迅速将动物直立、旋转,使药液在肺内分布均匀;


5.动物清醒后常规饲养,注意术后护理;


6.给予阳性药吡非尼酮。 

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检测结果:

一.结果分析

检测指标:

检测动物血清中NO含量、检测动物血清中IL-1β含量、肺组织病理学HE染色、肺组织病理学Masson染色、肺系数、肺组织湿/干重

55555.png 1.肺组织病理学HE染色:在Day21和Day28时,与Sham组相比,LPS组小鼠肺泡间隙增宽,病理学评分为4,肺泡腔内纤维化渗出严重,病理学评分为4,血管周围炎性细胞浸润严重,病理学评分为4,肺泡结构严重破坏;与Sham组相比,PFD组肺泡间隙增宽,病理学评分为2,肺泡腔内出现纤维化渗出,病理学评分为2,血管周围出现炎性细胞浸润,病理学评分为2,肺泡结构部分被破坏。

肺组织病理学Masson染色显现出:在Day21和Day28时,与Sham组相比,LPS组小鼠肺组织出现大量胶原沉积,肺泡结构破坏严重,肺纤维化程度极其严重;与Sham组相比,PFD组出现少数胶原沉积,肺泡部分结构被破坏,肺部出现轻微肺纤维化现象。 

1.小鼠血清中IL-1β的含量:与LPS组相比,Sham组与PFD组血清中IL-1β的含量明显降低,差异极其显著。


2.肺系数对比结果:,与LPS组相比,Sham组明显降低,有差异;PFD组有降低。


3.右肺组织湿干重比(W/D)结果:与LPS组相比,Sham组和PFD组明显降低,有差异。 




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