南京博恩生物技术有限公司面向高校、科研院所、医药企业与生物技术企业，提供从方案评估、抗体筛选、样本处理、染色成像到结果分析的一站式免疫组化实验外包服务。服务覆盖石蜡切片免疫组化、冰冻切片免疫组化、组织定位分析、半定量评分分析、阳性区域统计分析、病理图像整理及发表级图版输出。

免疫组化是一种利用抗原抗体特异性结合，在组织切片中原位检测目标蛋白表达、分布和定位的技术。与 Western blot 相比，免疫组化不仅能判断目标蛋白是否表达，还能保留组织结构信息，显示蛋白在组织中的空间分布、细胞定位和病理微环境特征，因此广泛应用于肿瘤研究、炎症研究、纤维化研究、组织分化研究及药效评价。

交付包含原始染色图、代表性视野图、统计分析结果图、阳性信号定量结果及完整中文报告。

项目完成后提供终身售后支持，针对图版整理、结果解释、投稿补充材料准备及后续问题持续响应。

服务适用场景

本服务适用于组织中目标蛋白定位分析、病理组织表达差异研究、肿瘤标志物分析、炎症浸润观察、纤维化与 EMT 研究、血管生成分析、核转位与膜定位研究、药物干预前后组织蛋白表达变化比较及论文发表配图。IHC 特别适合回答“蛋白在什么组织中表达”“在什么细胞中表达”“定位在细胞核、胞浆还是细胞膜”“阳性区域分布是否发生变化”等问题。CST 将 IHC 描述为适合在保持组织完整性的前提下分析蛋白表达和组织病变形态学特征的方法。

适用客户类型

• 高校与科研院所：课题机制研究、组织定位分析、论文配图、结题材料整理

• 医药企业：药效组织学评价、靶点表达定位、组织分布研究

• 生物技术企业：抗体应用验证、产品功能分析、空间表达评估

适用研究方向

• 肿瘤标志物表达与定位

• 炎症浸润与免疫微环境分析

• 纤维化、EMT 与组织重塑

• 血管生成与缺氧研究

• 凋亡、自噬、增殖相关组织表达

• 核转位、膜表达与亚细胞定位分析

服务流程

客户发送方案 → 方案评估 → 问题反馈与优化 → 正式报价 → 签订合同 → 支付预付款 → 开始实验 → 提交 PDF 版结果报告 → 支付尾款 → 提交完整报告。

流程说明

1. 客户发送方案
提交研究目的、目标蛋白、样本类型、分组设计、物种信息、组织来源及参考文献。

2. 方案评估
评估样本类型是否适合 IHC，确认石蜡切片或冰冻切片方案，确认抗原修复策略、抗体适用性及成像要求。

3. 问题反馈与优化
指出方案中可能存在的问题，如组织固定不规范、切片厚度不合适、目标蛋白更适合 IF 或 WB、抗体未验证 IHC 应用等，并进行优化。

4. 正式报价
根据样本数量、切片数量、目标指标数量、是否需要包埋切片、是否需要定量分析、是否需要病理图版整理等出具正式报价。

5. 签订合同并支付预付款
确认合作内容、周期、交付标准后启动项目。

6. 开始实验
进入脱蜡复水、抗原修复、封闭、抗体孵育、显色或复染、封片、显微成像和分析流程。

7. 提交 PDF 结果报告
实验完成后先提交 PDF 版结果报告供客户确认。

8. 支付尾款并提交完整报告
尾款支付完成后，提交完整终版报告、原始图、代表图、统计图及整理版发表素材。

样本要求

IHC 的实验结果高度依赖样本固定、包埋、切片质量和抗原保存情况。Abcam 的 IHC 指南指出，样本制备是获得高质量染色结果的关键步骤，常包括固定、脱水、包埋、切片、抗原修复、透化和封闭等环节；具体方案取决于样本类型和目标抗原特性。

样本要求表

交付内容

交付内容包含中文版实验报告、样本信息、抗体信息、实验方法、显色体系、拍照参数、图注、结果描述、结论总结、原始染色图、代表性视野图、阳性区域统计图、半定量评分结果、阳性细胞比例分析图、发表级整理图版及完整终版报告。

标准交付清单

• 中文版实验报告

• 样本与抗体信息

• 实验方法学描述

• 染色与成像参数

• 原始染色图片

• 代表性视野图片

• 阳性表达统计图

• 半定量评分结果

• 发表级图版整理

• 完整终版报告

售后支持

项目完成后提供终身售后支持，包括：

• 结果解释

• 染色定位分析说明

• 图版整理

• 投稿补充材料支持

• 后续答疑与补充说明

周期与报价方式

常规 IHC 项目周期通常为 5–10 个工作日。涉及组织包埋切片、多个指标检测、抗原修复条件优化、抗体筛选、重复染色、复杂统计分析或发表级图版整理的项目周期相应延长。

报价因素

• 样本数量

• 切片数量

• 目标蛋白数量

• 是否为石蜡切片或冰冻切片

• 是否需组织包埋与切片

• 是否需多指标连续染色

• 是否需阳性区域定量分析

• 是否需发表级图像整理

• 是否涉及特殊种属、特殊组织或特殊抗体

常见问题

免疫组化适合解决什么问题？
IHC 更适合回答目标蛋白在组织中是否表达、表达在哪些细胞中、定位在细胞核/胞浆/细胞膜何处、表达范围是否扩大、阳性区域比例是否变化等问题。Abcam 的 IHC 指南明确指出，IHC 的核心价值在于显示组织切片中抗原的分布和定位。

IHC 和 Western blot 的区别是什么？
IHC 用于观察组织中的定位与分布，保留组织结构；Western blot 更适合判断蛋白大小、条带特异性和修饰状态。

IHC 和免疫荧光的区别是什么？
IHC 多采用显色体系，适合常规组织定位和病理观察；免疫荧光更适合多色共定位、亚细胞定位和荧光成像分析。

石蜡切片和冰冻切片怎么选？
石蜡切片形态保存稳定、适用面广；冰冻切片更适合某些对固定敏感的抗原，但对保存和操作条件要求更高。

结果是否可直接用于发表？
交付包含原始图、代表图、统计图、图注说明及发表级整理图版，可直接用于论文配图、结题材料与项目汇报。

免疫组化原理

免疫组化利用抗体与组织切片中目标抗原发生特异性结合，再通过酶促显色或荧光信号将抗原分布可视化，从而在显微镜下观察目标蛋白在组织中的表达位置、表达范围和细胞定位。Abcam 将 IHC 定义为利用抗原—抗体结合在组织切片中检测特定蛋白的广泛应用方法，并强调该方法能显示抗原在组织中的分布和定位。

免疫组化实验步骤

1. 样本固定

组织固定用于维持组织结构和保留抗原性，是 IHC 的前提步骤。固定条件不当可能导致抗原丢失或背景升高。

2. 包埋与切片

组织根据实验类型进行石蜡包埋或冰冻包埋，再制备成适合显微观察的切片。切片厚度、完整度和附着性会影响染色均一性。

3. 脱蜡与复水

石蜡切片需先脱蜡并逐级复水，使组织重新暴露并适于后续反应。

4. 抗原修复

固定会改变部分抗原表位，因此常需热修复或酶修复以恢复抗体识别能力。

5. 封闭

通过封闭减少非特异性结合和内源性背景，改善染色特异性。

6. 一抗孵育

根据目标蛋白、物种和组织类型选择一抗，并优化稀释浓度与孵育条件。

7. 二抗与显色

使用与一抗匹配的检测体系进行显色，使目标信号可在明场显微镜下观察；如采用荧光体系，则转入免疫荧光分析路径。

8. 复染与封片

常用苏木精复染细胞核，以增强组织层次和形态学对比，再进行封片保存。

9. 显微成像

选择代表性区域进行拍照，记录阳性染色位置、强弱和组织结构特征。

10. 结果分析

根据项目需求进行阳性区域统计、阳性细胞比例分析、半定量评分及图版整理，形成适合发表和汇报的结果输出。

免疫组化与其他常见实验的对比分析

IHC 的核心优势是组织结构和空间定位；Western blot 更强调蛋白大小和修饰状态；ELISA 强于定量；IF 强于共定位；流式强于单细胞群体分析。

实验选择逻辑

不同细胞类型与应用场景常见标志物选择表

下表整理的是 IHC 中最常见、最适合官网展示的标志物选择逻辑，适用于科研客户在方案设计阶段快速判断“该看什么蛋白更合适”。这些标志物大多属于组织定位研究中的经典选择，例如 Ki-67 常用于增殖评估，CD31 常用于血管内皮与微血管密度分析，cleaved Caspase-3 常用于凋亡检测，CD68 常用于巨噬细胞浸润，GFAP 和 IBA1 常用于神经胶质和小胶质细胞研究，E-cadherin/Vimentin 常用于 EMT 研究。

标志物选择说明

• 血管分析 常优先选择 CD31，因其是经典内皮标志物，常用于组织样本中的内皮识别和微血管密度评估。

• 增殖分析 常优先选择 Ki-67，因为其在静止期 G0 细胞中通常不表达，在 G1 至有丝分裂阶段逐步升高，是经典增殖指标。

• 凋亡分析 常选择 cleaved Caspase-3，因为      Asp175 切割形式直接反映 caspase-3 激活。

• 巨噬细胞研究 常选择 CD68；T 细胞      常选择 CD3；B 细胞 常选择 CD20。

• 神经系统研究 中，GFAP 常用于星形胶质细胞，IBA1 常用于小胶质细胞。

• EMT 和纤维化研究 中，E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、α-SMA 是最常见的组合。

南京博恩生物技术有限公司提供面向科研客户与医药企业的免疫组化实验外包服务，覆盖组织定位分析、病理表达差异研究、炎症与纤维化研究、肿瘤微环境分析及发表级图版整理。项目交付包含原始染色图、代表性视野图、统计分析图、发表级大图及完整中文报告，并提供终身售后支持。
客户提交方案后，项目按“方案评估—问题反馈—报价签约—实验执行—PDF 结果确认—完整报告交付”的标准流程推进。交付结果可直接用于课题研究、论文整理、项目申报与结题汇报。