南京博恩生物技术有限公司面向高校、科研院所、医药企业与生物技术企业，提供从方案评估、抗体筛选、样本处理、染色成像到结果分析的一站式免疫组化实验外包服务。服务覆盖石蜡切片免疫组化、冰冻切片免疫组化、组织定位分析、半定量评分分析、阳性区域统计分析、病理图像整理及发表级图版输出。

公司以标准化实验流程为基础，结合项目评估、样本前处理、抗体应用筛选、病理图像分析和结果解释能力，为客户提供可用于机制研究、课题申报、论文发表及药效评价的组织表达证据。交付内容不仅包括原始染色图和代表性视野图，还包括统计分析结果、阳性信号定量结果、发表级图版及完整中文报告。项目完成后，提供长期售后支持，持续响应结果解释、图版整理、投稿补充材料准备及后续问题。

导读

一、服务概述
二、我们能为客户解决什么问题
三、为什么选择我们
四、质量控制与项目保障
五、服务内容
六、样本要求
七、标准服务流程
八、交付内容
九、周期与报价方式
十、博恩优势
附录A 免疫组化常见应用方向与推荐标志物
附录B 免疫组化与其他常见实验的选择逻辑
附录C 常见问题

一、服务概述

南京博恩生物技术有限公司面向高校、科研院所、医药企业与生物技术企业，提供从方案评估、抗体筛选、样本处理、染色成像到结果分析的一站式免疫组化实验外包服务。服务覆盖石蜡切片免疫组化、冰冻切片免疫组化、组织定位分析、半定量评分分析、阳性区域统计分析、病理图像整理及发表级图版输出。

公司以标准化实验流程为基础，结合项目评估、样本前处理、抗体应用筛选、病理图像分析和结果解释能力，为客户提供可用于机制研究、课题申报、论文发表及药效评价的组织表达证据。交付内容包括原始染色图、代表性视野图、统计分析结果、阳性信号定量结果、发表级图版及完整中文报告。项目完成后，公司提供长期售后支持，持续响应结果解释、图版整理、投稿补充材料准备及后续问题。

二、我们能为客户解决什么问题

免疫组化是一种利用抗原抗体特异性结合，在组织切片中原位检测目标蛋白表达、分布和定位的技术。与仅判断蛋白是否表达的检测方法相比，IHC 更强调在保留组织结构的前提下呈现蛋白在组织中的空间分布、细胞定位及病理微环境特征，因此特别适合组织水平的机制研究与病理观察。

该服务可帮助客户回答以下核心问题：目标蛋白是否在特定组织中表达；表达主要出现于哪些细胞类型；信号定位于细胞核、胞浆还是细胞膜；药物干预前后阳性区域或表达强度是否发生变化；肿瘤微环境、炎症浸润、纤维化区域或血管生成水平是否存在显著差异。

基于上述能力，服务适用于肿瘤标志物表达与定位、炎症浸润与免疫微环境分析、纤维化与 EMT 研究、血管生成与缺氧研究、核转位与膜定位分析、药物干预前后组织蛋白表达比较，以及论文配图和病理结果展示等场景。

三、为什么选择我们

1.1 方案评估能力

公司在项目启动前，会围绕研究目的、目标蛋白、样本类型、物种背景、组织来源及实验分组进行综合评估，判断项目是否适合采用 IHC 技术路径，并协助客户明确实验重点与结果输出方向。

1.2 抗体与指标筛选能力

针对不同目标蛋白、组织背景及研究问题，公司结合抗体适用性、定位预期和文献依据，协助客户判断抗体是否适合 IHC 应用，并对更适合采用 IHC、免疫荧光或 Western blot 的情况提出技术建议，提高实验设计的合理性。

1.3 样本处理与流程控制能力

公司可根据样本特点制定石蜡切片或冰冻切片方案，并围绕固定、包埋、切片、抗原修复、封闭、抗体孵育、显色复染和成像分析等关键步骤开展标准化实验，尽量降低前处理差异对结果稳定性的影响。

1.4 病理定位与结果解释能力

服务内容不仅包括染色图像，还重视组织结构完整性、阳性信号定位、表达范围变化和分组差异解释，帮助客户从图像结果进一步形成清晰结论，使结果更适合用于科研汇报、论文撰写和项目申报。

1.5 发表级图版整理能力

项目交付不仅包括原始结果，还可提供代表性视野筛选、统计图整理、图注规范化和发表级图版输出，减少客户在后期论文整理和成果展示中的重复工作。

四、质量控制与项目保障

IHC 结果与样本固定、抗原保存、抗体适配性及实验流程控制密切相关。为提高项目成功率和结果可靠性，公司在项目实施过程中重点强化以下保障环节。

1.1 前期风险识别

在正式实验前，对样本固定情况、组织完整性、切片质量、目标抗原特性及保存运输状态进行预评估，提前识别可能影响染色效果的风险因素。

1.2 抗体应用核查

针对目标蛋白和研究体系，优先评估抗体的 IHC 适用性，并结合组织背景、目标定位及文献依据判断是否需要进一步优化抗体稀释比例、修复条件或检测路径。

1.3 标准化实验执行

围绕脱蜡复水、抗原修复、封闭、一抗孵育、二抗显色、复染封片和显微成像等步骤建立规范流程，尽量控制批次差异和背景干扰。

1.4 结果判读与分析支持

在图像采集基础上，结合组织形态、染色定位、阳性区域和分组差异开展结果分析，可根据项目需求进行阳性区域统计、阳性细胞比例分析、半定量评分及图版整理。

五、服务内容

公司提供的免疫组化实验服务包括石蜡切片免疫组化、冰冻切片免疫组化、组织定位分析、半定量评分分析、阳性区域统计分析、阳性细胞比例分析、病理图像整理及发表级图版输出。针对科研项目、药效评价项目及企业研发项目，可根据研究目标灵活配置服务内容。

1.1 高校与科研院所

主要用于课题机制研究、组织定位分析、论文配图及结题材料整理。

1.2 医药企业

主要用于药效组织学评价、靶点表达定位和组织分布研究。

1.3 生物技术企业

主要用于抗体应用验证、产品功能分析及空间表达评估。

六、样本要求

IHC 实验结果与样本质量密切相关，因此不同样本类型在送样、保存和运输方面均需满足相应要求。

1.1 石蜡包埋组织

客户可提供完整蜡块或已制备的石蜡切片，通常采用常温运输方式，但需避免高温和挤压。该类型样本适用于大多数常规 IHC 项目。

1.2 石蜡切片

建议使用防脱载玻片，切片厚度通常为 3–5 μm。保存和运输时应常温避潮。组织结构完整、切片平整，有助于提高染色一致性和图像质量。

1.3 冰冻组织与冰冻切片

冰冻组织应在取材后尽快包埋并低温保存，运输过程中使用干冰并避免反复冻融。冰冻切片建议尽量新鲜制片，并在低温条件下运输。相较于石蜡切片，冰冻切片对保存条件更敏感，背景控制要求也更高。

1.4 新鲜组织与固定组织样本

新鲜组织可用于统一前处理和包埋切片，运输时需采用低温或固定液条件，并提前沟通。固定组织样本建议采用规范固定条件处理，并及时送样，避免固定时间过长或过短影响抗原性。

1.5 客户需同步提供的信息

为便于实验方案制定，客户应同步提供目标蛋白名称、物种信息、组织来源、分组信息、目标定位及参考文献，以便确定抗原修复条件、抗体体系及结果分析重点。

七、标准服务流程

1.1 客户发送方案

客户提交研究目的、目标蛋白、样本类型、分组设计、物种信息、组织来源及参考文献等基础信息。

1.2 方案评估

根据项目目标评估样本是否适合开展 IHC，确认石蜡切片或冰冻切片方案，并初步确定抗原修复策略、抗体适用性及成像要求。

1.3 问题反馈与优化

针对组织固定不规范、切片厚度不合适、抗体未验证 IHC 应用或目标蛋白更适合免疫荧光、Western blot 等情况进行反馈，并提出优化建议。

1.4 正式报价

根据样本数量、切片数量、目标指标数量、是否需要包埋切片、是否需要定量分析及发表级图版整理等因素提供正式报价。

1.5 签订合同并支付预付款

在确认合作内容、项目周期及交付标准后启动项目。

1.6 开始实验

项目进入脱蜡复水、抗原修复、封闭、抗体孵育、显色复染、封片、显微成像及结果分析流程。

1.7 提交 PDF 结果报告

实验完成后，先提交 PDF 版结果报告供客户确认。

1.8 支付尾款并提交完整报告

尾款支付完成后，提交完整终版报告、原始图、代表图、统计图及整理后的发表素材。

八、交付内容

项目交付内容包括中文版实验报告、样本信息、抗体信息、实验方法、显色体系、拍照参数、图注、结果描述、结论总结、原始染色图、代表性视野图、阳性区域统计图、半定量评分结果、阳性细胞比例分析图、发表级整理图版及完整终版报告。

九、周期与报价方式

常规 IHC 项目周期通常为 30–40 个工作日。若项目涉及组织包埋切片、多个指标检测、抗原修复条件优化、抗体筛选、重复染色、复杂统计分析或发表级图版整理，整体周期会相应延长。

项目报价主要受以下因素影响：样本数量、切片数量、目标蛋白数量、样本类型、是否需要组织包埋与切片、是否需要阳性区域定量分析、是否需要发表级图像整理，以及是否涉及特殊种属、特殊组织或特殊抗体。

十、博恩优势

南京博恩生物技术有限公司面向科研客户与医药企业提供系统化免疫组化实验外包服务，覆盖组织定位分析、病理表达差异研究、炎症与纤维化研究、肿瘤微环境分析及发表级图版整理。公司以方案评估、抗体筛选、标准化实验、病理图像分析和结果解释为核心，帮助客户获得更清晰、更规范、更具科研价值的组织表达证据。

附录A 免疫组化常见应用方向与推荐标志物

A1 血管生成分析

常用标志物包括 CD31、CD34、vWF，适用于血管内皮识别、微血管密度评估及肿瘤血管生成研究。

A2 淋巴管生成分析

常用标志物包括 LYVE1、Podoplanin、VEGFR3，适用于淋巴管识别及淋巴转移相关研究。

A3 细胞增殖分析

常用标志物包括 Ki-67、PCNA，适用于肿瘤增殖指数评估及药物干预前后增殖水平比较。

A4 凋亡分析

常用标志物包括 Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP、BAX，适用于凋亡水平评价及组织损伤研究。

A5 自噬分析

常用标志物包括 LC3B、Beclin-1、p62/SQSTM1，适用于自噬活性及自噬通路变化分析。

A6 细胞周期调控分析

常用标志物包括 Cyclin D1、p21、p27，适用于细胞周期推进或阻滞状态评估。

A7 DNA 损伤分析

常用标志物包括 γH2AX、53BP1，适用于 DNA 损伤应答及放化疗相关研究。

A8 巨噬细胞浸润分析

常用标志物包括 CD68、CD163、F4/80（鼠），适用于炎症反应和肿瘤相关巨噬细胞研究。

A9 T 细胞浸润分析

常用标志物包括 CD3、CD4、CD8，适用于肿瘤免疫微环境及炎症免疫研究。

A10 B 细胞浸润分析

常用标志物包括 CD20、CD79a，适用于淋巴组织及 B 细胞相关研究。

A11 NK 细胞分析

常用标志物包括 CD56、NKp46，适用于先天免疫及肿瘤免疫研究。

A12 中性粒细胞浸润分析

常用标志物包括 MPO、Ly6G（鼠），适用于急性炎症和感染模型研究。

A13 树突状细胞分析

常用标志物包括 CD11c、CD209、MHC II，适用于抗原递呈及免疫启动相关研究。

A14 调节性 T 细胞分析

常用标志物包括 FOXP3、CD25，适用于免疫抑制微环境研究。

A15 免疫检查点研究

常用标志物包括 PD-1、PD-L1、CTLA-4，适用于肿瘤免疫微环境及免疫治疗相关研究。

A16 炎症信号通路分析

常用标志物包括 NF-κB p65、COX-2、iNOS，适用于炎症激活及药物干预研究。

A17 氧化应激分析

常用标志物包括 4-HNE、8-OHdG、Nrf2，适用于氧化损伤及抗氧化应答研究。

A18 纤维化分析

常用标志物包括 α-SMA、Collagen I、Fibronectin，适用于器官纤维化和基质重塑研究。

A19 EMT 分析

常用标志物包括 E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail，适用于上皮向间质转化研究。

A20 上皮细胞识别与组织分型

常用标志物包括 Pan-CK、CK18、E-cadherin，适用于上皮来源确认及组织分型研究。

A21 间质细胞与成纤维细胞分析

常用标志物包括 Vimentin、FAP、α-SMA，适用于肿瘤基质、伤口修复及成纤维细胞活化研究。

A22 肿瘤干性分析

常用标志物包括 SOX2、OCT4、NANOG、CD133，适用于肿瘤干细胞及再生相关研究。

A23 缺氧分析

常用标志物包括 HIF-1α、CA9、GLUT1，适用于肿瘤低氧和缺血损伤研究。

A24 血管周细胞与平滑肌分析

常用标志物包括 α-SMA、Desmin、NG2，适用于血管成熟度和血管壁结构分析。

A25 神经元分析

常用标志物包括 NeuN、MAP2、βIII-Tubulin，适用于神经系统结构和损伤研究。

A26 星形胶质细胞分析

常用标志物包括 GFAP、S100β，适用于神经炎症和胶质反应研究。

A27 小胶质细胞分析

常用标志物包括 IBA1、TMEM119，适用于中枢免疫反应和小胶质细胞活化研究。

A28 少突胶质细胞与髓鞘分析

常用标志物包括 Olig2、MBP、CNPase，适用于脱髓鞘和神经发育研究。

A29 肝细胞分析

常用标志物包括 Albumin、HNF4α、Arginase-1，适用于肝组织分化、肝损伤及肝样分化研究。

A30 胆管与导管上皮分析

常用标志物包括 CK19、EpCAM，适用于胆管反应及导管上皮分型研究。

A31 肾小管与肾损伤分析

常用标志物包括 KIM-1、E-cadherin、AQP1，适用于肾损伤及肾小管结构研究。

A32 心肌细胞分析

常用标志物包括 cTnT、α-Actinin、Myosin Heavy Chain，适用于心肌损伤和心肌分化研究。

A33 骨形成分析

常用标志物包括 Runx2、OCN、ALP，适用于骨形成和骨修复研究。

A34 破骨细胞相关分析

常用标志物包括 TRAP、Cathepsin K，适用于骨吸收和骨代谢研究。

A35 软骨与关节研究

常用标志物包括 Collagen II、Aggrecan、SOX9，适用于软骨形成及退变研究。

A36 脂肪生成分析

常用标志物包括 PPARγ、FABP4、Adiponectin，适用于脂代谢和脂肪分化研究。

A37 骨骼肌研究

常用标志物包括 MyoD、Myogenin、Desmin，适用于肌发生和肌损伤修复研究。

A38 干细胞多能性分析

常用标志物包括 OCT4、SOX2、SSEA-4，适用于干细胞状态和分化潜能评估。

A39 内皮功能与屏障研究

常用标志物包括 VE-cadherin、Claudin-5、ZO-1，适用于血管屏障及内皮连接研究。

A40 肿瘤侵袭与基质降解分析

常用标志物包括 MMP2、MMP9、Vimentin，适用于侵袭转移及基质重塑研究。

附录B 免疫组化与其他常见实验的选择逻辑

B1 IHC 与 ELISA 的对比

B1.1 适用问题不同

IHC 更适合回答“目标蛋白在组织中哪里表达、由哪些细胞表达、阳性区域是否扩大或缩小”这类空间定位问题。ELISA 更适合回答“某种蛋白在血清、血浆、细胞上清或组织匀浆中的总浓度是否升高或降低”这类定量问题。

B1.2 结果呈现方式不同

IHC 的结果是组织切片层面的可视化图像，强调组织结构、病理形态和信号分布。ELISA 的结果通常为浓度值或吸光度值，强调总体含量变化，适合批量样本比较。

B1.3 各自优势不同

IHC 的优势在于保留组织结构，可提供空间定位证据，适用于病理观察、组织分型和微环境研究。ELISA 的优势在于检测通量高、定量能力强，适合开展体液样本检测和大批量筛查。

B1.4 选择建议

当研究目标是判断蛋白在组织中的定位和分布时，应优先选择 IHC；当研究目标是评估蛋白总量变化，尤其是分泌因子、炎症因子或血清指标时，更适合采用 ELISA。两者在很多项目中可以联合使用，IHC 提供空间证据，ELISA 提供定量支持。

B2 IHC 与 Western blot 的对比

B2.1 适用问题不同

IHC 更适合分析目标蛋白在组织中的表达位置、细胞定位及局部区域变化。Western blot 更适合分析目标蛋白是否表达、分子量是否正确、是否存在磷酸化、切割体或其他修饰形式。

B2.2 样本信息保留程度不同

IHC 保留组织形态和空间结构，能够显示病变区域、细胞群体和微环境差异。Western blot 基于裂解后的总蛋白样本进行分析，无法提供组织层面的空间信息。

B2.3 各自优势不同

IHC 的优势是定位明确、与病理形态关联紧密。Western blot 的优势是特异性较强，可观察条带大小，并可对蛋白修饰状态进行分析，适合做通路激活验证。

B2.4 选择建议

当研究重点是蛋白表达位置时，优先选择 IHC；当研究重点是蛋白是否被激活、切割、磷酸化，或分子量是否符合预期时，更适合选择 Western blot。若项目既需要定位证据又需要分子验证，二者联合使用更具说服力。

B3 IHC 与流式细胞术的对比

B3.1 适用问题不同

IHC 更适合在完整组织层面观察目标蛋白的空间分布、细胞定位和局部病理结构。流式细胞术更适合分析单细胞层面的细胞亚群组成、阳性率变化和多参数表达谱。

B3.2 数据类型不同

IHC 提供的是组织图像和形态学证据，可直观展示蛋白在组织中的分布特点。流式细胞术提供的是单细胞层面的定量数据，可快速统计不同细胞群体的比例、表型和表达强度。

B3.3 各自优势不同

IHC 的优势在于保留组织结构和空间关系，特别适合肿瘤微环境、炎症浸润区域和病理组织研究。流式细胞术的优势在于高通量、单细胞、多参数，能够精细区分免疫细胞亚群并进行定量比较。

B3.4 选择建议

当研究重点是细胞在组织中的位置及其与病灶区域的关系时，优先选择 IHC；当研究重点是某类细胞占比及不同亚群表达谱变化时，更适合采用流式细胞术。两者联合时，IHC 更偏向空间解释，流式细胞术更偏向定量和分群。

B4 IHC 与免疫荧光的对比

B4.1 适用问题不同

IHC 更适合常规组织定位、病理观察和单指标或少量指标的稳定检测。免疫荧光更适合多色共定位、核转位、亚细胞精细定位以及多指标同时观察。

B4.2 信号呈现方式不同

IHC 多采用酶促显色体系，在明场显微镜下观察，图像稳定、背景形态直观，适合常规切片分析和病理展示。免疫荧光采用荧光信号检测，适合高分辨率观察和多色成像，但对拍摄条件、荧光淬灭和背景控制要求更高。

B4.3 各自优势不同

IHC 的优势在于组织形态对比清晰、结果稳定、便于保存和展示，适合常规科研、病理分析和服务化交付。免疫荧光的优势在于可实现多标共定位及亚细胞尺度观察，适合研究蛋白共表达关系和精细定位。

B4.4 选择建议

当研究目标是组织定位、病理差异和发表级明场图像输出时，优先选择 IHC；当研究目标是多色共定位、核转位和亚细胞精细分布分析时，更适合选择免疫荧光。若课题兼顾组织形态和多标共表达，两者可作为互补技术使用。

B5 综合选择原则

总体而言，IHC 的核心优势在于保留组织结构、提供空间定位证据，并能将蛋白表达与病理形态联系起来；ELISA 的优势在于总量定量；Western blot 的优势在于蛋白大小和修饰状态验证；流式细胞术的优势在于单细胞高通量分群分析；免疫荧光的优势在于多色共定位和精细亚细胞观察。

实验方法的选择应始终围绕研究问题本身展开：需要空间定位时优先考虑 IHC，需要总量定量时考虑 ELISA，需要通路与条带验证时考虑 Western blot，需要细胞亚群比例和多参数分析时考虑流式细胞术，需要多标共定位和精细定位时考虑免疫荧光。

附录C 常见问题

C1 免疫组化适合解决什么问题

IHC 适合回答目标蛋白在组织中是否表达、主要表达于哪些细胞、定位在细胞核、胞浆还是细胞膜，以及阳性区域范围和表达强度是否发生变化等问题。

C2 IHC 和 Western blot 的区别是什么

IHC 侧重组织中的定位与分布，并保留组织结构；Western blot 更适合分析蛋白大小、条带特异性和修饰状态。

C3 IHC 和免疫荧光的区别是什么

IHC 多采用显色体系，适合常规组织定位与病理观察；免疫荧光更适合多色共定位、核转位及亚细胞定位研究。

C4 石蜡切片和冰冻切片应如何选择

石蜡切片形态保存更稳定，适用范围更广；冰冻切片更适合部分对固定敏感的抗原，但对样本保存和操作条件要求更高。

C5 交付结果是否可直接用于发表

项目交付包含原始图、代表图、统计图、图注说明及发表级整理图版，可直接用于论文配图、课题材料整理和项目汇报。